用分级定量RT—PCR测定中国人血清中HCV RNA

摘要

目的 利用分级定量方法建立分级测定血清中HCV RNA含量的定量方法。方法 设立3个DNA标准竞争模板(102cop，104cop，106cop)分别和恒量的待测RNA模板cDNA共同进行PCR扩增，最后用凝胶电泳分离待测模板和竞争模板的PCR产物，测定两者的荧光强度比值，计算待测RNA的模板初始量。结果 该方法灵敏度为1×101cop，对丙型肝炎患者血清HCV RNA定量，结果表明，10份HCV RNA阳性血清中，HCV RNA的血清浓度在3×105～6×108cop·L-1之间。结论 该方法可用于HCV RNA以及其他RNA病毒的RNA定量。