人釉原蛋白编码区基因真核表达载体PsecTaq2A-AMG的构建

摘要

目的构建人釉原蛋白(AMG)编码区基因真核表达载体PsecTaq2A-AMG.方法采用PCR技术体外扩增AMG完整分泌肽编码区.将扩增产物与PsecTaq2A分别用BamH I和Xhol I行双酶切,将获取的AMG目的基因片段连接到双酶切后的PsecTaq2A,构建重组质粒PsecTaq2A-AMG,并对重组质粒进行鉴定.结果①PCR扩增产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳,可见大小约519 bp的特异性条带,与预期结果一致.②重组克隆PsecTaq2A-AMG酶谱分析与预期结果一致,序列测定结果与GenBank中的人釉原蛋白序列完全一致.结论用此方法可成功构建AMG编码区基因真核表达载体PsecTaq2A-AMG.