CD 40激发肿瘤抗原特异性DCs对CIK细胞生物学活性的影响

摘要

目的:研究CD 40激发凋亡肿瘤细胞致敏的树突状细胞(dendritic cells,DCs)对细胞因子诱导杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞的细胞表型、增殖活性及细胞毒活性的影响.方法:常规方法从健康人外周血单个核细胞中诱导DCs和CIK细胞,采用凋亡肿瘤细胞负载DCs,并用或不用激发型CD 40单克隆抗体(CD 40 mAb)激活DCs成熟;成熟DCs与同源的CIK细胞共育5 d,分别获得DC40Ag-CIK细胞及DCAg-CIK细胞;观察细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞表型;酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assays,ELISA)法检测细胞培养上清液中IFN-γ的含量;[3H]-TdR掺入法测定细胞杀伤活性.结果:凋亡肿瘤细胞负载激发可使DCs上调表达CD 1a、CD 80、CD 86、CD 83、HLR-DR,联合CD 40 mAb激发可进一步促进DCs成熟;培养至第14天时,DC40Ag-CIK细胞、DCAg-CIK细胞、CIK细胞分别扩增(18.2±1.7)倍、(15.0±1.2)倍、(9.3±1.8)倍;DC40Ag-CIK细胞中的CD 3+CD 56+比例较DCAg-CIK细胞和CIK细胞明显上调(P＜0.05);DC40Ag-CIK细胞、DCAg-CIK细胞对A 549杀伤活性强于CIK细胞(P＜0.05),并且DC40Ag-CIK细胞强于DCAg-CIK细胞(P＜0.05);CIK细胞、DCAg-CIK细胞、DC40Ag-CIK细胞培养上清液中IFN-γ的含量递增,分别为(1 494.7±246.3)pg/mL、(2 706.3±197.0)pg/mL、(3 676.3±335.0)pg/mL.结论:与单独凋亡肿瘤细胞负载的DCs相比,CD40激发的凋亡肿瘤细胞负载的DCs可进一步提高CIK细胞的增殖活性及细胞毒活性.