p27KIP1过表达对人胃癌细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响

摘要

目的研究p27KIP1基因对胃癌细胞的细胞周期和细胞凋亡的潜在作用. 方法采用脂质体转染法将p27KIP1全长cDNA转入胃癌细胞系SCG7901中,通过Western Blot以及RNA斑点杂交检测p27KIP1基因在蛋白质和mRNA水平的表达;细胞活力实验和软琼脂集落形成实验显示转染p27KIP1基因对细胞增殖的作用;DNA电泳、流式细胞仪、TUNEL染色及透射电镜等方法观察目的基因对该细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响. 结果转染p27KIP1的SCG7901细胞在mRNA和蛋白质水平均有高水平p27KIP1的表达.细胞活力检测显示在外加Zn离子48h后细胞生长被抑制42%;软琼脂集落形成率明显少于亲代细胞(P<0.01);p27KIP1的过表达能够显著地增加G1期的细胞数,由33.68%增加到69.29%,P<0.01;在G1期前出现1个亚二倍体的凋亡峰,占14.68%,并且凋亡指数也显著增加(P<0.01).结论 p27KIP1基因能够诱导SCG7901细胞凋亡和细胞周期在G1期延长.因此,p27KIP1基因可能成为肿瘤基因治疗的靶基因.