反义寡聚脱氧核苷酸的合成与纯化

摘要

近年兴起的反义技术为开发抗病毒药物带来了新的希望,其中反义寡聚脱氧核苷酸(antisense oligodeoxynucleotidc,as ODN)抗人乙型肝炎病毒(HBV)的研究是其热点之一。通过互补于HBV基因或其mRNA的人工合成的asODN可达到抗HBV的目的。为了增强抗病毒效果,本文设计了针对HBV2.1KbmRNA起始区、表面抗原基因起始区、e抗原基因起始区的三个硫代磷酸反义寡聚脱氧核苷酸片段。根据固相亚磷酸酰胺合成法,利用DNA合成仪,合成了均为18个碱基长度的三个as ODN片段。经过从固相载体上的切下、去保护基和变性聚丙稀酰胺凝胶电泳的纯化与鉴定,采用浸泡法最终回收到了所需的as ODN片段并测定了其DNA含量。