抗mecR1反义硫代寡聚脱氧核苷酸逆转MRSA耐药性

摘要

目的:以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药基因mecR1mRNA为靶点设计反义硫代寡聚脱氧核苷酸,导入MRSA后观察其对MRSA耐药性的影响.方法:利用电穿孔的方法将反义寡核苷酸(5μg·ml-1、10μg·ml-1、15μg·ml-1)导入细菌内,菌液复苏后在含苯唑西林(16μg·ml-1)的M-H琼脂培养基平板上涂板,35°C恒温孵育24h,计数菌落数(CFU).从MRSA中提取总RNA,进行RT-PCR扩增出目的基因MecR1,以16srRNA为内参照观察MecR1的表达变化.结果:反义寡核苷酸组MRSA的菌落数较对照组明显减少,并具有剂量依赖性.反义寡核苷酸能显著抑制MRSAMecR1mRNA的表达,有效的降低MRSA的耐药性.结论:抗MecR1mRNA反义寡核苷酸能有效的逆转MRSA对β-内酰胺类抗生素的耐药性.