过氧化氢对FRTL细胞线粒体膜电位和超氧化物生成的影响

摘要

目的:探讨外源性过氧化氢(H2O2)对Fisher大鼠甲状腺细胞系(FRTL)线粒体膜电位(△ψ)和超氧化物生成的影响.方法:用1 mmol/L H_2O_2处理FRTL细胞10 min、30 min、24 h后,利用MitoSOX,通过活细胞影像法、流式细胞术检测线粒体超氧化物生成;利用罗丹明123(rh123),通过荧光分光光度计和荧光显微镜检测△ψ;MTT比色法检测细胞活力;光镜观察细胞形态学变化;吖啶橙(AO)染色检测细胞凋亡.结果:与对照组相比,1 mmol/L H_2O_2处理的FRTL细胞10 min、30 min、24 h,细胞内MitoSOX荧光强度明显增强,rh123荧光强度和MTT吸光度明显下降(P＜0.01),光镜下可见细胞脱壁、破碎,AO染色可见核变小、变圆,染色质浓缩、边集,核碎裂改变.结论:1 mmol/L H_2O_2急性处理(10 min,30 min)和慢性处理(24 h)均能明显增加FRTL细胞线粒体超氧化物生成,降低线粒体膜电位,造成细胞坏死和凋亡.