人PD-L1真核表达载体的构建及其在HEK293细胞系中的稳定转染

摘要

目的 构建含有人PD-L1基因的真核表达载体,并通过稳定转染获得稳定表达PD-L1分子的HEK293细胞系.方法 从人心脏cDNA文库中扩增出PD-L1基因,通过双酶切(Xho1和EcoR1)装入真核表达载体pIRES2-EGFP中,脂质体法转染HEK293细胞,通过G418筛选,建立稳定高表达PD-L1分子的HEK293细胞系,通过流式细胞术、RT-PCR及Western blot分析PD-L1的表达.结果 构建了真核表达载体pIRES2-EGFP/PD-L1,建立了稳定转染PD-L1目的基因的HEK293细胞系.结论 成功构建了PD-L1真核表达载体并获得了稳定转染该分子的HEK293细胞系.