利用正交设计优化甘蔗SRAP-PCR反应体系

摘要

利用正交设计L16(45)对甘蔗SRAP-PCR反应体系的五大因素(Mg2+、dNYPs、引物、模板DNA、Taq酶)在4个水平上进行优化,得到如下结论:各因素水平变化对PCR反应的影响从大到小依次是:Mg2+、dNTPs、引物、Taq酶和模板DNA;通过对各因素进行筛选,建立甘蔗SRAP-PCR反应的最佳体系(20μL)为:dNTPs 0.25 mmol/L、引物0.1μmol/L、Mg2+ 2.5 mmol/L、Taq酶0.25U和模板DNA 60 ng.