6种根瘤菌系统发育分析及其耐硒能力

摘要

[目的]研究不同硒含量土壤中生长的紫云英和大豆共生根瘤菌种类和硒耐受能力.[方法]采用涂布平板法从植物根瘤中分离根瘤菌,提取根瘤菌总DNA,进行16S rDNA扩增、克隆与测序,并建立系统发育树进行分子系统发育分析.再将各菌株在不同浓度含硒平板上进行培养,以菌落变红为临界条件,筛选各菌株的硒耐受能力.[结果]①从高硒土壤上生长的紫云英和大豆根瘤中分离纯化得到5个根瘤菌菌株,从低硒土壤上生长的大豆根瘤中分离纯化出1个根瘤菌菌株.②6个菌株分属4个不同的属别,竹山、炼铁湾、渔塘坝紫云英根瘤菌供试菌株归属土壤杆菌属(Agrobacterium)、低硒大豆根瘤菌供试菌株归属慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium)、高硒大豆根瘤菌供试菌株归属中华根瘤菌属(Sinorhizobium)、曾家紫云英根瘤菌供试菌株归属根瘤菌属(Rhiw-bium).③竹山、炼铁湾、渔塘坝紫云英根瘤菌耐硒能力均为6μg/mL,曾家紫云英根瘤菌耐硒能力为5.μg/mL,低硒、高硒大豆根瘤菌耐硒能力均为3μg/mL.[结论]在高硒自然环境(竹山、炼铁湾、渔塘坝、曾家)下生长的根瘤菌有较强耐硒能力,紫云英根瘤菌的耐硒能力高于大豆根瘤菌.