企鹅珍珠贝GLUT1基因全长cDNA克隆及其对葡萄糖的表达响应

摘要

葡萄糖转运蛋白(GLUTs)是能量代谢的关键因子,为了探索GLUT1(glucose transporter type1)在企鹅珍珠贝(Pteria penguin)中的功能,开展了企鹅珍珠贝GLUT1基因的克隆与功能研究.利用RACE技术克隆出企鹅珍珠贝GLUT1基因,并命名为PpGLUT1.该基因cDNA全长为2 068 bp,编码522个氨基酸,有2个跨膜螺旋区,N端和C端都在胞质侧,分子量为57.226 4 kD,理论等电点为5.17.不同组织荧光定量结果表明,在肠和外套膜中表达量最高,闭壳肌中的表达量显著低于其他组织.0.5 g·mL-1的高质量浓度葡萄糖注射实验表明,在注射后30 min内,肠PpGLUT1表达量升高,在30 min之后表达量逐渐降低,注射后第2小时表达量最低.不同浓度葡萄糖注射实验表明,当葡萄糖质量浓度为0.1 ～0.4 g·mL-1时,PpGLUT1表达量逐渐上升;质量浓度为0.4g·mL-1时,PpGLUT1表达量最高;大于0.4 g·mL-1之后,表达量逐渐降低.上述结果表明,企鹅珍珠贝PpGLUT1主要在肠和外套膜表达,并对葡萄糖注射有表达响应,可能在上述组织的葡萄糖转运过程中发挥作用.