昆明小鼠胰腺导管上皮样细胞向胰岛样细胞的诱导分化

摘要

目的 研究正常昆明小鼠胰腺导管上皮样细胞向胰岛样细胞分化的诱导条件.方法 取正常成年昆明小鼠胰腺导管上皮进行原代培养,利用细胞贴壁时间的差异在培养24、48、72 h连续换液除去腺体细胞,在含2%胎牛血清的培养条件下除去成纤维细胞,使可以在无血清培养基中生长的胰腺导管上皮样细胞形成优势生长.在此条件下培养并传代.取第三代细胞以无血清诱导培养基促使其分化.取诱导后3、5、7、14 d的细胞进行免疫细胞化学染色鉴定.ELISA检测诱导生成的胰岛样细胞在高糖刺激下分泌胰岛素的功能.结果 经过元血清诱导培养基诱导7 d后,胰腺导管上皮样细胞开始向胰岛素分泌细胞分化,胰岛素抗体染色阳性.14 d胰岛素抗体染色阳性细胞明显增多.该细胞在高糖刺激下可以分泌胰岛素.结论 昆明小鼠胰腺导管上皮样细胞经过无血清培养基诱导可以向胰岛样细胞方向分化.并且该胰岛样细胞在高糖刺激下具有分泌胰岛素的功能.