腹腔注射并饮服海藻糖的糖尿病小鼠肾功能、肾组织结构及凋亡自噬相关蛋白表达观察

摘要

目的 观察海藻糖(TLS)腹腔注射联合口服对糖尿病小鼠肾组织的保护作用,并探讨其可能作用机制.方法 SPF级雄性C57BI/6J小鼠60只随机分为正常对照组、糖尿病模型组(DM组)、TLS正常对照组(TLS组)、TLS糖尿病模型治疗组(DM+ TLS组)各15只,DM组、DM+ TLS组小鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)50 mg/(kg·d),制作DM模型.造模成功后,DM+ TLS组、TLS组腹腔注射TLS,1 mg/(kg·d),连续注射2d,随后2％浓度的TLS饮水给药,连续干预24周.DM组与正常对照组小鼠均腹腔注射等量超纯水,连续2d,后饲养期间正常饮水.干预24周时,取各组小鼠,摘除眼球取血检测各组血清尿素(BUN)、肌酐(CRE)及尿酸(UA).处死小鼠取肾组织,测算肾脏脏器系数,HE染色后观察肾脏显微结构,Western blotting法检测各组肾脏组织凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-1、Caspase-3以及自噬相关蛋白Beclin-1、p62、LC3B.结果 与正常对照组比较,干预24周时DM组小鼠血清BUN、CRE、UA含量升高(P均＜0.05),镜下可见肾小球肥大,肾小球基底膜增厚,肾小球、肾小管细胞呈气球样变.与DM组比较,干预24周时DM+ TLS组血清CRE、UA含量降低(P均＜0.05),肾脏病变改善明显.与正常对照组比较,DM组肾脏组织Bax、Caspase-1、Caspase-3相对表达量升高,Bcl-2相对表达量降低(P均＜0.05);与DM组比较,DM+ TLS组肾脏组织Bax、Caspase-1、Caspase-3相对表达量降低,Bcl-2相对表达量升高(P均＜0.05).与正常对照组比较,DM组肾脏组织P62相对表达量升高,Beclin-1、LC3B相对表达量降低(P均＜0.05);与DM组比较,DM+ TLS组肾脏组织P62相对表达量降低,Beclin-1、LC3B相对表达量升高(P均＜0.05).结论 TLS腹腔注射并饮服对DM小鼠肾脏产生保护作用,其机制可能为TLS降低Bax、Caspase-1、Caspase-3及P62表达,促进Bcl-2、Beclin-1及LC3B表达.