益母草碱对小鼠脑缺血再灌注损伤的影响及机制

摘要

目的 探讨益母草碱(LEO)对小鼠脑缺血再灌注损伤的影响及机制.方法 选择普通级健康雄性昆明小鼠120只,随机分为假手术组、模型组、LEO组3组,每组40只.模型组、LEO组制备小鼠大脑中动脉栓塞模型.假手术组除不插入线栓外,其余操作同模型组.造模后30 min,LEO组腹腔注射LEO溶液15 mg/(kg·d),假手术组和模型组腹腔注射等体积生理盐水.造模后24 h,取梗死部位脑组织,采用TTC染色法测定脑梗死体积,称重测脑含水量以评价脑水肿程度,采用伊文思蓝(EB)法测定血脑屏障通透性,采用HE染色法观察脑组织形态,采用免疫印迹法检测脑组织p-p38及紧密连接蛋白(ZO-1)表达,采用RT-PCR法检测脑组织炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达.结果 模型组脑梗死体积比、脑含水量、EB含量均高于假手术组,LEO组脑梗死体积比、脑含水量、EB含量均低于模型组(P均<0.05).模型组皮层及海马大片神经元细胞间疏松水肿,细胞核固缩未见有清晰核仁、炎症细胞浸润等缺血缺氧坏死的病理改变,而LEO组与模型组相比脑组织病理改变显著改善.模型组脑组织p-p38蛋白表达高于假手术组、ZO-1蛋白表达低于假手术组,LEO组p-p38蛋白表达低于模型组、ZO-1蛋白表达高于模型组(P均<0.05).模型组脑组织IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达均高于假手术组,LEO组IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达均低于模型组(P均<0.05).结论 LEO能改善缺血再灌注小鼠的神经损伤,减轻血脑屏障的渗透性;其机制可能与抑制p38 MAPK信号通路,从而减轻炎症反应有关.