脑缺血再灌注

摘要： 目的研究银杏内酯(GK)和白果内酯(BB)对大鼠脑缺血再灌注损伤后水通道蛋白4(AQP4)表达的影响。方法Wistar大鼠随机分为4组:假手术组、大脑中动脉缺血(MCAO)模型组(MCAO组)、银杏内酯组(GK组)和白果内酯组(BB组)。后两组分别设不同干预剂量亚组,即GK 2.5组(2.5 mg/kg GK腹腔内注射),GK5组(5 mg/kg GK腹腔内注射),GK10组(10 mg/kg GK腹腔内注射);BB 2.5组(2.5 mg/kg BB腹腔内注射),BB5组(5 mg/kg BB腹腔内注射),BB10组(10 mg/kg BB腹腔内注射)。模型组及各剂量GK和BB组大鼠行MCAO,假手术组不插线栓。缺血2 h再灌注12 h后,对大鼠神经功能评分。HE染色及TTC法测定脑梗死体积变化,Western blot法检测各组大鼠缺血侧脑皮层区AQP4蛋白的表达。结果相对于MCAO组,GK组和BB组大鼠神经功能症状明显改善,脑梗死范围明显减小,AQP4蛋白水平降低。结论银杏内酯和白果内酯对脑缺血再灌注损伤的保护作用可能与其抑制AQP4表达有关。

摘要： 背景:既往电针对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用及时效性的机制研究较少。目的:观察不同时间电针对脑缺血再灌注大鼠MAPK家族3条信号通路中p-ERK、p-JNK及p-p38MAPK蛋白表达的影响,探索电针发挥脑保护作用的具体机制。方法:150只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组(后2组线栓法制备右侧大脑中动脉栓塞缺血模型),每组50只,每组再设脑缺血1.5 h后再灌注2 h、6 h、1 d、3 d、7 d共5个时间亚组,每亚组10只。电针各亚组在规定时间点行单次电针治疗,选取“合谷”“尺泽”“足三里”“三阴交”,予疏密波,频率2 Hz,强度1 mA,治疗20 min;电针的同一时间抓取模型组和假手术组的大鼠进行固定,但不进行电针干预。在相应时间点进行神经功能缺损评分,之后大鼠麻醉后取脑,TTC染色法观察脑梗死面积,免疫荧光双标法结合检测p-ERK、p-JNK、p-p38MAPK的表达。结果与结论:①与假手术组相比,模型组同时段各亚组神经功能缺损评分升高、脑梗死体积增大(P<0.05);与模型组相比,电针组再灌注6 h、1 d、3 d亚组神经功能缺损评分显著降低、脑梗死体积明显减少(P<0.05);②与模型组比较,电针组再灌注1,3 d出现p-ERK表达的明显上调(P<0.05)及p-JNK的表达显著下降(P<0.05),p-p38MAPK在再灌注6 h、3 d时下降明显再灌注;③结果说明电针可减少脑梗死体积,减轻神经功能缺损,并上调p-ERK同时下调p-JNK、p-p38MAPK的表达,且电针在再灌注6 h-3 d内效果最佳;电针促进缺血再灌注引起的脑组织损伤修复,通过调控MAPK家族信号通路发挥脑保护作用。

摘要： 背景:电针干预曲池、足三里穴位能够起到神经保护作用,改善患者的运动功能,然而针对其作用机制的深入研究则相对较少.目的:基于神经调节蛋白1/表皮生长因子受体4信号通路观察电针干预对脑缺血再灌注损伤模型大鼠的神经保护作用.方法:取90只SPF级雄性Wistar大鼠,采用改良线栓法制备脑缺血再灌注损伤大鼠模型,并随机分为模型组、非穴位组和穴位组;另取30只大鼠只予以左侧颈部血管的分离作为假手术组.造模后3 h,非穴位组用电针刺激右侧肢体腋横纹下和尾骨尖下3 mm的非穴位处,穴位组用电针刺激曲池和足三里,共治疗7 d;假手术组和模型组不予任何治疗,只进行与治疗组相同条件的抓取与固定.造模完成后,以神经功能缺损评分进行模型评价;治疗结束后评价各组大鼠的神经功能缺损评分;检测缺血侧局部脑血流量和血流速度;TTC染色观察并计算脑梗死体积;电镜观察神经元的超微结构;TUNEL染色观察神经细胞凋亡情况;Western blotting检测神经调节蛋白1/表皮生长因子受体4通路蛋白表达水平.结果 与结论:①与假手术组相比,模型组和非穴位组大鼠的神经功能缺损评分、脑梗死体积、神经细胞凋亡率、神经调节蛋白1、表皮生长因子受体4蛋白表达水平明显升高,脑血流量、脑血流速度明显下降(P0.05);②与模型组相比,穴位组大鼠的神经功能缺损评分、脑梗死体积、神经细胞凋亡率明显下降,脑血流量、脑血流速度、神经调节蛋白1、表皮生长因子受体4蛋白表达水平明显上升(P<0.05),神经元超微结构明显改善;③说明电针刺激曲池、足三里穴位能够明显改善脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能缺损状态和脑神经元超微结构,抑制神经细胞凋亡,起到神经保护作用,其机制可能与神经调节蛋白1/表皮生长因子受体4信号通路的调控有关.

摘要： 背景:既往电针对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用及时效性的机制研究较少.目的:观察不同时间电针对脑缺血再灌注大鼠MAPK家族3条信号通路中p-ERK、p-JNK及p-p38MAPK蛋白表达的影响,探索电针发挥脑保护作用的具体机制.方法:150只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组(后2组线栓法制备右侧大脑中动脉栓塞缺血模型),每组50只,每组再设脑缺血1.5 h后再灌注2 h、6 h、1 d、3 d、7 d共5个时间亚组,每亚组10只.电针各亚组在规定时间点行单次电针治疗,选取"合谷""尺泽""足三里""三阴交",予疏密波,频率2 Hz,强度1 mA,治疗20 min;电针的同一时间抓取模型组和假手术组的大鼠进行固定,但不进行电针干预.在相应时间点进行神经功能缺损评分,之后大鼠麻醉后取脑,TTC染色法观察脑梗死面积,免疫荧光双标法结合检测p-ERK、p-JNK、p-p38MAPK的表达.结果 与结论:①与假手术组相比,模型组同时段各亚组神经功能缺损评分升高、脑梗死体积增大(P<0.05);与模型组相比,电针组再灌注6 h、1 d、3 d亚组神经功能缺损评分显著降低、脑梗死体积明显减少(P<0.05);②与模型组比较,电针组再灌注1,3 d出现p-ERK表达的明显上调(P<0.05)及p-JNK的表达显著下降(P<0.05),p-p38MAPK在再灌注6 h、3 d时下降明显再灌注;③结果 说明电针可减少脑梗死体积,减轻神经功能缺损,并上调p-ERK同时下调p-JNK、p-p38MAPK的表达,且电针在再灌注6 h-3 d内效果最佳;电针促进缺血再灌注引起的脑组织损伤修复,通过调控MAPK家族信号通路发挥脑保护作用.

摘要： 目的探讨普罗布考对高脂血症(HL)大鼠脑缺血再灌注后神经功能、脑梗死比例及核转录因子κB(NF-κB)表达影响。方法选取120只健康雄性SD大鼠,普通喂养1 d后分为普通组(20只),高脂血症组(100只),分别给予普通饲料喂养和高脂饲料喂养。高脂血症组大鼠按照随机数字表法分为假手术组、缺血再灌注组、低剂量普罗布考组、高剂量普罗布考组,各25只大鼠。低剂量普罗布考组、高剂量普罗布考组分别给予100、500 mg/kg灌胃,假手术组及缺血再灌注组给予相同剂量单一0.5%羧甲基纤维素钠灌胃,每日1次,连续2周。除假手术组外,缺血再灌注组、低剂量普罗布考组、高剂量普罗布考组制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,以脑缺血2 h再灌注时间点的不同(6、12、24、48、72 h)随机分为5个亚组(每组5只),缺血2 h后再灌注24 h行氯化三苯基四氮唑(TTC)染色计算脑梗死体积比;检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,评估各组大鼠神经功能障碍,检测NF-κB阳性表达差异。结果HL组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平均显著高于普通组,HDL-C水平显著低于普通组,差异均有统计学意义(P<0.05)。在术后12~72 h,低剂量普罗布考组、高剂量普罗布考组的神经功能评分显著高于缺血再灌注组,高剂量普罗布考组在术后12~72 h的神经功能评分显著高于低剂量普罗布考组,差异均有统计学意义(P<0.05)。低剂量普罗布考组、高剂量普罗布考组脑梗死体积比显著低于缺血再灌注组,且高剂量普罗布考组脑梗死体积比显著低于低剂量普罗布考组,差异均有统计学意义(P<0.05)。低剂量普罗布考组、高剂量普罗布考组在术后12~72 h的脑缺血区NF-κB阳性细胞数量显著低于缺血再灌注组,且高剂量普罗布考组各时间点脑缺血区NF-κB阳性细胞数量均显著低于低剂量普罗布考组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论普罗布考对于改善HL大鼠脑缺血再灌注后神经功能、减少脑梗死体积比,降低NF-κB阳性表达有着积极意义。

摘要： 目的观察针康法对局灶性脑缺血再灌注模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠神经功能及胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)/信号传导及转录激活蛋白(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3),即STAT通路的影响,探讨其干预星形胶质细胞活化保护神经功能的相关作用机制。方法90只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组、康复组、针康组共5组,每组各18只。采用Longa改良线栓法建立大鼠MCAO,评定造模成功后,分别给予针刺、康复和针康法干预治疗,于治疗第6小时、3天、7天、14天分别采用Zea-Longa’s级标准评分和mNSS评分评价神经功能,免疫组化法和实时荧光定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)检测脑组织GFAP、表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)阳性表达和mRNA水平;蛋白质印迹法(western blot,WB)检测脑组织抗体—磷酸化蛋白质激酶(phospho-Janus kinase 1,p-JAK1)、P-STAT3蛋白表达。结果干预治疗后,针刺组、康复组和针康组大鼠的的Zea-Longa’s级标准评分和mNSS评分在第3天、7天、14天时均较模型组明显降低(P<0.05),且各组评分均随时间呈现下降趋势。免疫组化和RT-PCR结果可见,各治疗组大鼠在干预治疗后的脑组织GFAP、EGFR阳性细胞计数和mRNA水平均较模型组明显减少(P<0.05),且以针康组为最低。WB结果可见,各治疗组大鼠在干预治疗后的脑组织P-JAK1、P-STAT3蛋白表达均较模型组明显降低(P<0.05),且以针康组为最低。结论针康法干预治疗脑缺血再灌注大鼠能够有效改善神经功能损伤,该作用机制可能是通过调控GFAP/STAT3通路抑制星形胶质细胞活化实现的。

摘要： 目的:评价丙酮酸乙酯(EP)对脑缺血再灌注损伤时小胶质细胞M1/M2极化表型的影响。方法:雄性SD大鼠72只,体重220~250 g,采用随机数字法分为三组:假手术组(Sham组)、大脑中动脉栓塞组(MCAO组)和丙酮酸乙酯+大脑中动脉栓塞组(EP+MCAO组)。MCAO组和EP+MCAO组采用Zea-Longa法制备大鼠MCAO模型,并在栓塞大脑中动脉90 min后拔除线栓,分别静脉注射0.9%氯化钠溶液或EP溶液。Sham组与其他两组在同一时间静脉注射0.9%氯化钠溶液。分别于造模后24、48、72 h时,进行神经功能缺损评分(NSS);处死大鼠进行TTC染色检测脑梗死容积;取缺血侧脑组织匀浆,采用酶联免疫法(ELISA)检测炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)及脑源性神经营养因子(BDNF)的浓度;采用免疫荧光染色法和Western blot法检测小胶质细胞M1型极化标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和M2型极化标志物精氨酸酶-1(Arg-1)的表达。结果:与Sham组比较,MCAO组和EP+MCAO组NSS、脑梗死容积、IL-1β、IL-6、IL-10、BDNF浓度升高、iNOS和Arg-1表达上调(均P<0.05);与MCAO组比较,EP+MCAO组NSS、脑梗死容积、IL-1β、IL-6浓度降低,iNOS表达下调(均P<0.05),IL-10、BDNF浓度升高,Arg-1表达上调(均P<0.05)。结论:EP减轻脑缺血再灌注损伤的机制可能与调控小胶质细胞极化,抑制炎性反应有关。

摘要： 目的基于网络药理学研究石斛碱抗脑缺血再灌注损伤(CIRI)的作用机制。方法通过数据库Pharmmapper、BATMAN-TCM和GeneCards分别对石斛碱及疾病靶点进行预测,利用VENNY2.1.0进行映射得到石斛碱作用于CIRI的潜在靶点,再导入Cytoscape3.8.2软件构建蛋白-蛋白交联互作网络(PPI)。利用R语言的clusterProfiler软件包对石斛碱抗脑缺血再灌注损伤的潜在靶点进行基因本体(Gene Ontology,GO)富集分析和京都基因及基因组百科全书(KEGG)富集通路分析。结果找到石斛碱相关靶点214个,脑缺血再灌注损伤相关靶点513个,交集靶点58个,PPI分析度值排名前10的核心靶基因有ALB、MAPK1、MAPK8、CASP3、IGF1、SRC、NOS3、MMP2、HSP90AA1和ESR1。通过KEGG富集通路分析得到14条显著通路,与相关文献检索报道有关的为Rap1信号通路、MAPK信号通路、趋化因子(chemokine)信号通路等。结论石斛碱通过多靶点、多途径治疗CIRI,其可能主要通过炎症、凋亡等途径起到抗CIRI的作用。

摘要： 从实验动物的选择、造模方法的选择、线栓的选择、进线深度、再灌注时间、中医证型的建立等多个方面对脑缺血再灌注痰瘀互结证动物模型制作方法的研究现状进行综述。认为制作成功的病证结合脑缺血再灌注痰瘀互结证动物模型对脑血管疾病的研究具有重要意义,雄性大鼠是缺血性脑卒中基础研究的理想动物,采用该动物复制的脑缺血再灌注模型具有成功率高、死亡率低、梗死面积大、模型稳定等特点;线栓法是目前最常选用的造模方法,采用高脂饲养复合大脑中动脉栓塞的方法可以成功建立局部脑缺血再灌注痰瘀互结证大鼠模型。

摘要： 目的:基于过氧化损伤相关分子醛糖还原酶(aldose reductase,AR)及NADPH(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate)氧化酶(nadph oxidase,NOX)亚型,探讨益脑康胶囊对脑缺血再灌注模型小鼠的作用机制。方法:90只C57健康雄性小鼠随机分为假手术组、模型组、益脑康高、中、低剂量组,采用线栓法制备短暂性大脑中动脉缺血再灌注模型,给药后观察记录各组小鼠神经功能缺损评分,氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色法检测小鼠脑梗死体积,ELISA法检测缺血半暗带区过氧化产物活性氧(reactive oxygen species,ROS)、4-羟基壬烯醛(4-Hydroxynonenal,4-HNE)和8-羟基-2′-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHDG)的含量,荧光定量PCR和Western Blot法检测缺血半暗带区AR、NOX1、NOX2、NOX4 mRNA和蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组的神经功能缺损评分、脑梗死体积明显增加(P<0.05,P<0.01),ROS、4-HNE、8-OHDG表达与AR、NOX1、NOX2、NOX4在mRNA和蛋白水平的表达均显著增加(P<0.01)。与模型组比较,益脑康中、高剂量组脑缺血再灌注损伤后神经功能缺损评分、脑梗死体积明显降低(P<0.05),ROS、4-HNE、8-OHDG的表达和AR、NOX1、NOX2、NOX4在mRNA和蛋白水平的表达均明显降低(P<0.01)。结论:益脑康胶囊通过减少AR及NOX1、NOX2、NOX4等过氧化损伤分子的表达,对脑缺血再灌注小鼠发挥神经保护作用。

摘要： 缺血性脑卒中占脑卒中发生率的60％～70％,而其治疗方法临床上以溶栓为主,溶栓后发生的再灌注又会引发进一步的损伤,而其损伤机制至今未能完全阐明清楚.线粒体作为机体器官的主要功能细胞器,在发生脑缺血再灌注的时候会一系列级联反应,是缺血再灌注损伤的重要靶器官,会导致的脑组织氧供和能量代谢紊乱.现就脑缺血再灌注后线粒体损伤变化的研究进展予以综述.

摘要： 目的：进一步观察电针对脑缺血再灌注模型中细胞凋亡的保护作用,并探索Nrf2信号通路是否参与其中. 方法：以野生型(WT)和Nrf2-/-(KO)小鼠为研究对象,按随机数字表分别随机分为电针组、模型组和假手术组3组,每组有效例数各30例.模型组和电针组采用改良Longa线栓法制备大脑中动脉缺血再灌注模型.电针组予以再灌注的同时,进行“百会”、“大椎”穴电针.针刺穴位深度为3mm-5mm,电针波形采用疏密波,频率为2/15Hz,以针柄轻微颤动、穴区局部轻微抖动为度,连续治疗15min.再灌注24h后采用Julio氏18分制评分法观察行为学评分、TTC染色法观察脑梗死体积、免疫组化法检测Bax和Bcl-2阳性细胞数量及平均光密度、qRT-PCR法检测mRNA含量等指标.数据采用SPSS23.0进行统计分析. 结果：与相对应模型组比较,WT电针组行为学评分升高、脑梗死体积减小、Bax阳性细胞数和平均光密度、Bax mRNA含量降低,Bcl-2相应表达量升高,且均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);KO电针组相应指标差异则无统计学意义.与WT电针组比较,KO电针组行为学评分降低、脑梗死体积增大、Bax阳性细胞数和平均光密度、Bax mRNA含量增高,Bcl-2相应表达量降低,且均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01). 结论：电针可通过降低Bax的表达,升高Bcl-2的表达从而抑制细胞凋亡的发生,减小梗死区域,提高神经功能评分,从而发挥电针对脑缺血再灌注损伤的达到脑保护的作用,其作用机制可能与Nrf2信号通路有关.

摘要： 目的：观察电针百会、足三里穴对脑缺血大鼠Bcl-2和Bax表达的影响,从细胞凋亡的角度探讨电针治疗该病的机制. 方法：SD大鼠随机分为假手术组,模型组和电针组,根据再灌注时间又分为24h和72h组,假手术组：仅分离血管,不插入线栓,固定在布袋20min,不进行电针治疗.模型组：制作脑缺血再灌注模型,每日固定同假手术组.电针组：电针百会穴和左侧足三里穴,日1次/20min.规定时间点取大鼠脑组织,以免疫蛋白印记法及实时荧光定量PCR法检测缺血脑组织Bcl-2、Bax蛋白及mRNA表达. 结果：电针组Bcl-2蛋白及mRNA表达显著高于同一时间点的模型组(P＜0.05),Bax蛋白及mRNA表达显著低于同一时间点的模型组(P＜0.05). 结论：电针大鼠百会、足三里穴能上调Bcl-2蛋白及基因表达水平,下调Bax蛋白及基因水平,电针减轻缺血再灌注后脑损伤,可能与上述调节相关.

摘要： 目的：探索胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血再灌注(I/R)后血脑屏障(BBB)的保护作用和机制. 方法：应用栓线法建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,腹腔注射胡黄连苷Ⅱ干预治疗.大鼠脑缺血2h再灌注22h后,ELISA检测脑组织活性氧(ROS)的含量,TTC染色测量梗死体积,依文思蓝法检测BBB的通透性,硝酸镧透射电镜观察BBB的结构,Westernblot检测ROCK、MLCK、MMP-2、Claudin-5的表达水平. 结果：大鼠造模后,脑组织ROS含量增高,皮质区梗死明显,BBB的通透性增加、结构受损;胡黄连苷Ⅱ治疗后,大鼠脑组织梗死体积明显缩小,BBB渗漏率和镧颗粒漏出显著减少,表明胡黄连苷Ⅱ对脑I/R后的BBB有较好的保护作用.模型组大鼠脑组织ROCK、MLCK、MMP-2表达明显增强,Claudin-5表达明显减弱.胡黄连苷Ⅱ组大鼠ROCK、MLCK、MMP-2表达下降,Claudin-5表达明显增强,且降解减弱,实现对BBB的保护作用. 结论：胡黄连苷Ⅱ可能通过下调ROCK、MLCK、MMP-2表达,上调Claudin-5表达,从而减轻BBB损伤,发挥神经保护作用.

摘要： 目的：抗炎化合物在脑缺血再灌注模型(MCAO/R)中具有巨大的神经保护作用.本研究探讨神经调节素1β(NRG-1β)在MCAO/R后通过抑制c-Jun磷酸化从而保护神经元的机制及意义. 方法：采用改良Longa法制备大鼠脑缺血2h再灌注24h模型,改良神经功能缺损评分(mNSS)评价神经行为功能,TTC染色测量梗死体积,依文思蓝法检测血脑屏障(BBB),尼氏染色检测神经元形态,透射电镜检测神经元的超微结构,TUNEL及NeuN双染色检测神经元凋亡,免疫荧光双标及western blot检测phospho-c-Jun的蛋白定位、定量及共表达. 结果：大鼠MCAO/R后mNSS评分升高,梗死体积增大,BBB的完整性破坏,神经元形态结构异常,神经元凋亡细胞数增多,神经元phospho-c-Jun蛋白表达增强.NRG-1β处理后可改善大鼠神经行为功能,减少脑梗死体积,降低伊文思蓝渗透率,减轻神经元的异常形态结构,降低神经元凋亡细胞数,抑制神经元c-Jun的磷酸化. 结论：NRG-1β在对脑缺血再灌注损伤的保护神作用机制可能与抑制c-Jun的磷酸化有关.

摘要： 目的：探讨失荅刺知丸对大鼠脑缺血再灌注后脑组织损伤血管修复及Notch4表达的影响. 方法：将102只SD大鼠随机分为17组,每组6只,分别为：空白组、假手术组、模型组、尼莫地平组、失苔剌知丸低剂量组、失荅剌知丸中剂量组、失荅剌知丸高剂量组,其中模型组和给药组又根据再灌注时间分为1d、3d、7d组.以上各组除空白、假手术组外,均采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO).各组在观察饲养相应天数后取材;电镜观察脑缺血受损血管恢复情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),测定缺血再灌注损伤大鼠脑组织中Notch4蛋白与基因的相对表达量. 结果：电镜结果提示,失荅剌知丸组损伤血管恢复良好,失荅剌知丸各组比较,随着用药剂量和治疗时间的增加损伤血管修复程度递增;Western blot、PCR结果显示,与空白组和假手术组相比,失荅剌知丸各组Notch4蛋白和基因表达显著升高,表达量与给药剂量和治疗时间成正相关(P<0.01). 结论：失荅剌知丸对脑缺血大鼠再灌注后血管损伤修复有促进作用;该作用可能与受损脑组织中的Notch4表达上调有关.

摘要： 目的：探讨栝楼桂枝颗粒抗脑缺血再灌注损伤大鼠氧化应激的保护作用及分子机制. 方法：建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,栝楼桂枝颗粒灌胃给药后,核磁共振成像(Magnetic Resonance Imaging,MRI)检测大鼠脑梗死面积,试剂盒测定脑组织活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)活力,Western Blot和Real-time PCR分别检测脑组织中蛋白表达和mRNA相对含量的影响. 结果：栝楼桂枝颗粒能够明显减小大鼠脑梗死面积,减少ROS和MDA的产生(P＜0.01),增加SOD、CAT和GSH-Px活力(P＜0.01).此外,栝楼桂枝颗粒能够上调脑组织中核Nrf2(NF-E2-related factor2,Nrf2)、细胞质中血红素加氧酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)、醌氧化还原酶1(NAD(P)H：quinone oxidoreductase1,NQO1)及Kelch样ECH联合蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein1,Keap1)的表达. 结论：栝楼桂枝颗粒可能通过上调Nrf2信号通路,从而抑制脑缺血再灌注损伤引起的氧化应激反应.

摘要： 缺血性脑血管病是当今世界主要的致死、致残的疾病之一.缺血再灌注会导致一定的损伤,缺血区域血流恢复供应之后,大量的自由基或者其他的一些损伤因素会对这部分区域内的组织造成损伤.脑缺血再灌注损伤包括许多环节,如:线粒体损伤、钙超载、氧自由基的累积、炎症反应及细胞凋亡等.中医中药治疗缺血性脑卒中已有几千年的历史,在防治脑缺血疾病方面有着良好的疗效,常用的治疗脑缺血损伤的药物有水蛭、丹参、川芎、赤芍、黄芪等.丹皮酚具有镇静、催眠、解热、镇痛、抗炎、抗菌等药理作用，大量实验研究已表明丹皮酚还能够显著减少缺血再灌注大鼠的梗死面积。以往研究表明，丹皮酚通过抑制血小板聚集、降低血黏度、改善微循环等作用而增加低灌注期的局部血流量。目前有关脑缺血再灌注损伤机制的研究越来越多，有关炎症反应学说和细胞凋亡学说的研究成为近几年研究的热点。

摘要： 目的：观察加减补中益气汤对脑缺血再灌注大鼠梗死灶白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子α(Tumour necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响. 方法：选用SD健康大鼠60只,体重320+20g,雌雄各半,随机分为6组：假手术组、模型组、尼莫地平组、加减补中益气汤高、中、低剂量组;假手术组和模型组给予蒸馏水3mL/110g.d;尼莫地平组给予尼莫地平混悬液3mL/100g.d(0.6mg/110g);加减补中益气汤高、中、低剂量组分别给予临床用药量的25、20、15倍水煎浓缩液灌胃,用量均按人与大鼠体表面积等效剂量折算,各组等容灌胃每日两次,灌胃6天后,第7天采用Longa等线栓法复制大脑急性脑缺血再灌注损伤模型(造模前2h最后一次给药),在造模后第12h进行神经功能缺损评分,测量脑指数,测定IL-1β、TNF-α含量,光镜下做脑组织病理形态学观察. 结果：模型组大鼠脑指数降低、神经体征评分明显高于假手术组(p＜0.05);与模型组相比,给药组大鼠脑指数降低、神经体征明显改善(p＜0.01),有显著性差异;与模型组相比,给药组大鼠脑组织IL-1β,TNF-α的含量明显降低,有显著统计学意义;与尼莫地平组相比,加减补中益气汤高剂量组脑指数明显降低(p＜0.05)、脑组织IL-1β,TNF-α的含量降低明显(p＜0.05).病理组织学检查发现模型组大鼠脑组织出现不同程度的水肿,神经细胞轴索肿胀、断裂等缺血样改变,给药组大鼠上述病变明显减轻. 结论：加减补中益气汤能明显改善脑缺血再灌注大鼠神经体征,可下调脑指数、降低脑组织IL-1β,TNF-α的含量,对脑缺血再灌注大鼠脑组织病理形态有较强的改善作用;在加减补中益气汤大、中、小剂量各治疗组中,尤以加减补中益气汤高剂量组、中剂量组效果好,可能通过影响脑缺血再灌注后的炎症反应过程而起到脑保护作用,其作用优予尼莫地平组.

摘要： 目的：丹红注射液前期信息学研究发现,其防治疾病可通过固有免疫途径,本研究以细胞模型实验,研究丹红注射液通过固有免疫途径介导脑缺血再灌注的神经保护机制. 方法：采取LPS刺激的Transwell非接触小胶质细胞和神经元体外共培养模型,western blot测定小胶质细胞中TLR4表达时程与TUNEL法测定原代神经元凋亡数量,免疫荧光观察原代神经元形态学变化,并western blot检测小胶质细胞下游信号通路的变化. 结果：小胶质细胞中TLR4表达时程与神经元凋亡数一致,LPS刺激下与神经元单独培养组相比,共培养模型下神经元细胞凋亡增多或者发光减弱,丹红注射液干预后,共培养模型下比单独培养模型下观察到的神经元损伤减少.Western blot方法表明丹红注射液干预后,小胶质细胞下游信号通路中的NF-κB,JNK,ERK,p38信号分子磷酸化抑制,炎症因子释放减轻. 结论：本研究表明丹红注射液通过抑制小胶质细胞TLR4途径介导神经元保护作用,其作用机制TLR4途径上NF-κB、MAPK信号通路的活化抑制关联.

摘要： 一种模拟脑缺血再灌注病理模型的芯片，属于微流控技术领域。主要包括四层，第一层为培养液以及接种细胞入口，第二层与二三层芯片之间的多孔膜共同模拟的是血脑屏障系统，每层芯片上都设有液体流入或流出的通道，第三层芯片与三四层芯片之间的多孔膜共同模拟脑组织功能单元，芯片上同样有液体流入或者流出的通道，第四层芯片为培养液出口，此外，二三层芯片以及三四层芯片之间设有细微孔道。本发明具备多细胞共培养能力，通过多孔膜和培养孔设计能够实现多细胞间通过培养液流动的细胞间不接触的信息交流，进而模拟人脑缺糖缺氧过程进而模拟人脑缺血过程、脑缺血后的再灌注。

摘要： 本发明属于生物技术领域，涉及miR‑328‑3p在制备脑梗死及脑缺血再灌注预后预测试剂中的应用。本发明提出血清外泌体miR‑328‑3p在脑梗死及脑缺血再灌注预后预测和治疗中的应用，并通过具体试验结果进行了验证，为脑梗死及脑缺血再灌注预后预测试剂和试剂盒以及预后药物的研发提供新思路。

摘要： 本发明属于生物技术领域，涉及miR‑328‑3p在制备脑梗死及脑缺血再灌注预后预测试剂中的应用。本发明提出血清外泌体miR‑328‑3p在脑梗死及脑缺血再灌注预后预测和治疗中的应用，并通过具体试验结果进行了验证，为脑梗死及脑缺血再灌注预后预测试剂和试剂盒以及预后药物的研发提供新思路。

摘要： 一种模拟脑缺血再灌注病理模型的芯片，属于微流控技术领域。主要包括四层，第一层为培养液以及接种细胞入口，第二层与二三层芯片之间的多孔膜共同模拟的是血脑屏障系统，每层芯片上都设有液体流入或流出的通道，第三层芯片与三四层芯片之间的多孔膜共同模拟脑组织功能单元，芯片上同样有液体流入或者流出的通道，第四层芯片为培养液出口，此外，二三层芯片以及三四层芯片之间设有细微孔道。本发明具备多细胞共培养能力，通过多孔膜和培养孔设计能够实现多细胞间通过培养液流动的细胞间不接触的信息交流，进而模拟人脑缺糖缺氧过程进而模拟人脑缺血过程、脑缺血后的再灌注。

摘要： 本发明属于小鼠脑缺血再灌注模型技术领域，公开了一种小鼠脑缺血再灌注模型的优化及败果评价方法，所述小鼠脑缺血再灌注模型的优化及败果评价系统包括：视频监控模块、时间模块、主控模块、麻醉模块、消毒模块、切割模块、插入模块、拔出模块、脑血管三维构造模块、症状监测模块、显示模块。本发明通过脑血管三维构造模块显示小鼠脑缺血再灌输术后脑血管情况，不仅能够有效分割脑血管粗大分支，而且还能精确提取脑血管细小结构；同时，通过术中生命体征(包括体温、脉搏、呼吸、血压)监测，提高小鼠生存率，通过术后症状监测模块能给出小鼠脑缺血再灌注后神经功能损伤的定量评价，对缺血性脑卒中的预防、疗效评价等均具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种减少并发症的脑缺血再灌注实验动物模型的制作方法，包括以下：颈动脉暴露程序；颈外动脉近心端活扣结扎，不剪断；动脉剪口在颈内动脉近心端；插入拴线致大脑中动脉缺血；到达预定缺血时间，打开颈内动脉远心端线结；拔出拴线；于切口处植入动脉管；胶水固定颈总动脉切口；1分钟内避免周围组织接触胶水，令其自然固化；2分钟后胶水逐渐干燥固化，外部不会与周围组织粘连时，内部通过插管保持颈内动脉血流再灌；收尾操作程序。本发明的操作方法不需结扎剪断颈外动脉、甲状腺上动脉等，操作比较简便，便于动物的后续饲养，尤其是可以做长期药物效果观察模型。适用于推广应用。

摘要： 本发明涉及一种在基于GC‑MS联用技术的脑缺血再灌注代谢组学(脂质组学)研究的方法。属于医药学技术领域。本发明包括如下步骤：(1)血浆样品预处理；(2)GC‑MS联用技术对血浆样品进行检测；(3)对数据进行分析：进行代谢物鉴定并找出最终的差异代谢物，通过在线分析软件对差异代谢物进行通路分析。数据分析内容主要包括：(1)利用XCMS在线数据处理软件对得到的原始数据进行处理(2)单维统计与多维统计相结合探究组别之间代谢差异(3)筛选并鉴定出对差异贡献大的变量并对其进行分析(4)利用MetaboAnalyst在线软件对代谢通路进行分析。本发明的方法简单，且减小了样本处理过程带来的误差。

摘要： 本发明涉及医药技术领域，具体涉及转录因子FoxO3在制备脑缺血再灌注保护神经损伤药物中的应用。本发明构建两种过表达FoxO3质粒并包装成腺病毒Ad‑WT‑FoxO3和Ad‑TM‑FoxO3调控FoxO3的表达，探讨在OGD/R和MCAO/R损伤中FoxO3对自噬相关蛋白LC3和Beclin‑1表达的影响。本发明经实验证明FoxO3过表达可促进自噬相关蛋白的激活，对脑缺血再灌注损伤有保护作用。本发明为脑缺血损伤防治提供新思路、新途径，为神经保护剂的研究提供新的靶点。

摘要： 本发明公开了一种治疗局灶性脑缺血再灌注炎症反应的冻干粉剂及其制备方法，该冻干粉剂由Apelin-13、人血清白蛋白、甘露醇、右旋糖酐和精氨酸组成，经过原料混合、活性炭吸附、过滤、微过滤和冻干等步骤制备得到；本发明所述的冻干粉剂及采用本发明制备方法所得的冻干粉剂能明显减少脑梗死体积，对于治疗局灶性脑缺血再灌注损伤具有良好的治疗效果；本发明所述的冻干粉剂及采用本发明制备方法所得的冻干粉剂能降低海马组织内MPO活性，上调APJ蛋白的表达水平，下降Iba1，GFAP及HMGB1蛋白表达水平；抑制中性粒细胞在脑缺血区的激活、黏附、聚集，减少细胞毒性物质的释放，减轻缺血区的炎症反应，发挥神经保护作用。

摘要： 一种大鼠颈外动脉保留置管脑缺血再灌注模型建立的方法，其方法是：游离大鼠颈外动脉血管的方向，将大鼠颈外动脉血管的方向游离到与大鼠颈内动脉血管的方向一致或平行的位置；在颈外动脉血管切开一个切口插入线栓，在大鼠颈内形成脑缺血；插入线栓形成脑缺血1-2小时之后，将线栓拔出，再置入一个可重复注射药物导管注射囊。通过颈外动脉线栓法制作大鼠缺血再灌注模型，保护了术侧颈总和颈内动脉的正常结构，同时在颈外动脉内保留了可重复注射药物的导管注射囊，实现反复不同时间点，经动脉导管向颈内动脉注射的目的。同时实现了造模后神经功能评估，合格动物才能入组接受实验干预，极大的提高了实验的科学性。