Wy14643对缺氧复氧损伤原代大鼠肝细胞的保护作用及机制

摘要

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)选择性激动剂Wy14643对原代大鼠肝细胞缺氧复氧损伤的保护作用及机制.方法 采用两步灌流法分离大鼠肝细胞并进行原代培养,将培养细胞随机分成6组:C组(正常组)、H/R组(缺氧复氧组)、D组(对照组)、Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组.Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组均在缺氧前2 h加入Wy14643(终浓度分别是10、30、100 μmol/L)再行复氧处理.将肝细胞缺氧4 h、复氧10 h诱导细胞损伤,然后分别收集细胞培养上清液和肝细胞,测定上清液中谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)活性和细胞内谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,MTT法测定肝细胞的存活率,电子显微镜观察肝细胞损伤情况.结果 与C组比较,H/R组ALT、AST、MDA增高(P<0.01),SOD、GSH下降(P<0.01),细胞存活率降低(P<0.01).Wy14643处理后,肝细胞上清液ALT、AST活性降低,并且呈剂冒依赖性(P<0.01);肝细胞内SOD、GSH活性增强(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05);细胞存活率升高(P<0.05).电子显微镜显示H/R组肝细胞比C组损伤明显,Wy14643处理后损伤逐渐减轻.结论 Wy14643对肝细胞缺氧复氧损伤有保护作用,可能与提高肝细胞抗氧化能力有关.