利格列汀对体外高糖诱导后人肾小管上皮细胞E-cadherin、α-SMA表达的影响及机制

摘要

目的：探讨利格列汀对体外高糖诱导后人肾小管上皮细胞钙黏附蛋白E（E-cadherin）、肌动蛋白α（α-SMA）表达的影响及机制。方法将体外培养的人肾小管上皮细胞（HK-2细胞）随机分为正常对照组、高糖组、高糖＋Wnt4 siRNA组、高糖＋β-catenin siRNA组、高糖＋利格列汀组，高糖＋Wnt4 siRNA组、高糖＋β-catenin siRNA组分别转染siRNA沉默Wnt4、β-catenin，12 h后与高糖组、高糖＋利格列汀组同时加入D-葡萄糖（葡萄糖终浓度为30 mmol／L），高糖＋利格列汀组同时加入利格列汀（终浓度10μmol／L），继续培养48 h。采用Western blotting法检测各组E-cadherin、α-SMA、Wnt4、β-catenin蛋白表达，倒置显微镜观察细胞形态学改变，测定细胞长与宽比值。结果与正常对照组比较，高糖组E-cadherin表达下调、α-SMA、Wnt4、β-catenin表达上调（P均＜0．05）；与高糖组比较，高糖＋Wnt4 siRNA组、高糖＋β-catenin siRNA组、高糖＋利格列汀组E-cadherin表达上调、α-SMA表达下调（P均＜0．05）。高糖组细胞由卵圆形伸长呈梭形，高糖＋利格列汀组细胞由卵圆形向梭形改变程度减轻。高糖组细胞长／宽较正常对照组、高糖＋利格列汀组升高（P均＜0．05）。结论利格列汀可部分抑制体外高糖诱导的人肾小管上皮细胞E-cadherin表达下调、α-SMA表达上调，其机制可能与Wnt4／β-catenin通路有关。