基于SIRT1/TGF-β1/Smad通路研究三七皂苷对高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞EMT的影响

摘要

[目的]研究三七皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对高糖诱导后肾小管上皮细胞发生上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的修复作用及其相关机制.[方法]培养肾小管上皮细胞株NRK-52E细胞,分为正常对照组、高糖组、白藜芦醇(resveratrol,RSV)组、PNS组、沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)抑制剂EX527组和EX527+PNS组.药物干预48h后收集细胞;采用免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、E-钙黏着蛋白(E-cadherin,E-cad)的蛋白表达;Real-time RT-PCR检测SIRT1、α-SMA、E-cad、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad3、Smad4的基因表达,Western blot检测SIRT1、α-SMA、E-cad、TGF-β1的蛋白表达.[结果]与正常对照组比较,高糖诱导后的NRK-52E细胞出现明显的EMT表现,即α-SMA蛋白表达增多(P＜0.05),E-cad蛋白表达减少(P＜0.01).与高糖组比较,PNS组α-SMA蛋白表达减少(P＜0.05),E-cad和SIRT1蛋白表达增加(P＜0.01,P＜0.01),TGF-β1、Smad3、Smad4基因表达降低(P＜0.01,P＜0.05).EX527干预后,PNS作用受到抑制.[结论]PNS对肾小管上皮细胞具有保护作用,其机制可能是通过激活SIRT1抑制TGF-β1/Smad通路,从而阻止高糖诱导的EMT的发生.