苦参素联合复方茵陈颗粒预处理对大鼠急性肝衰竭的防治作用观察

摘要

目的 观察苦参素(OMT)联合复方茵陈颗粒(FYK)预处理对大鼠急性肝衰竭的防治作用,并探讨其机制.方法 雄性SD大鼠90只,随机分为实验1组、实验2组、实验3组、OMT组、损伤组、对照组,每组15只.OMT组腹腔注射OMT 120 mg/kg,1次/d;实验1组、实验2组、实验3组分别灌服3、6、12 g/(kg·d)的FYK,2 h后再注射OMT,剂量参照OMT组;对照组和损伤组腹腔注射等容量生理盐水;各组用药连续3 d.用药2 d后大鼠禁食24 h,除对照组外,其余各组腹腔注射D-氨基半乳糖(D-GalN)、皮内注射脂多糖(LPS).24 h后处死大鼠,HE染色观察肝组织病理改变、全自动生化分析仪检测血清ALT、AST(ALT>1 700 IU/L、AST>1 500 IU/L)以评价肝衰竭发生情况;流式细胞术测算肝组织中细胞凋亡率;Western blotting法检测肝组织中的TLR4、p38、p-p38、JNK及p-JNK蛋白;免疫组化SP法检测肝组织中的TLR4、Bax、Bcl-2和active-caspase-3蛋白.结果 损伤组实验过程中死亡5只,OMT组死亡1只,死因均为肝衰竭.对照组及实验1、2、3组大鼠均存活.OMT组及实验1、2、3组肝组织病理损伤较损伤组减轻.损伤组血清AST、ALT水平高于其余各组,OMT组血清AST、ALT水平低于损伤组,实验2、3组血清AST、ALT水平低于OMT组(P均<0.05).损伤组肝衰竭发生率100％,OMT组为66.7％,实验1、2、3组分别为53.3％、40％、33.3％,OMT组及实验1、2、3组肝衰竭发生率低于损伤组,且OMT组与实验1、2、3组肝衰竭发生率依次降低(P均<0.05).损伤组肝细胞凋亡率高于其余各组,OMT组肝细胞凋亡率低于损伤组,实验3组肝细胞凋亡率低于OMT组(P均<0.05).与其余各组相比,损伤组肝组织中TLR4蛋白相对表达量增高,p-p38/p38、p-JNK/JNK增高;OMT组肝组织中TLR4蛋白相对表达量和p-p38/p38、p-JNK/JNK低于损伤组;实验2、3组肝组织中TLR4蛋白相对表达量和p-p38/p38、p-JNK/JNK低于OMT组,且实验3组低于实验2组(P均<0.05).损伤组肝组织中TLR4、Bax、active-caspase-3蛋白表达积分高于其余各组,OMT组TLR4、Bax、active-caspase-3蛋白表达积分低于损伤组,实验3组低于OMT组(P均<0.05).损伤组肝组织中Bcl-2蛋白表达积分低于其余各组,OMT组Bcl-2蛋白表达积分高于损伤组,实验3组高于OMT组(P均<0.05).结论 OMT联合FYK预处理对肝衰竭有一定防治作用,可减轻肝组织病理损伤,减少肝细胞凋亡,机制可能包括TLR4、active-caspase-3蛋白表达下调,p-p38/p38、p-JNK/JNK、Bax/Bcl-2下降,TLR4/p38/JNK信号通路功能抑制等.