骨髓间充质干细胞尾静脉注射治疗大鼠肝损伤的效果及机制

摘要

目的：观察骨髓间充质干细胞尾静脉注射治疗大鼠肝损伤的效果，并探讨其机制。方法将30只 SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组，每组10只。模型组和治疗组大鼠用连续4个月皮下注射 D-半乳糖的方法成功制备大鼠肝损伤模型。治疗组大鼠造模成功后尾静脉注射3×106个用绿色荧光蛋白标记的间充质干细胞，对照组注射同等剂量的生理盐水。3 d 后检测各组大鼠血清天冬氨酸转氨酶（AST）、谷氨酸转氨酶（ALT）。处死各组大鼠，取肝组织制备冰冻切片，荧光显微镜下观察间充质干细胞分布，行 HE 染色观察肝组织病理结构；取肝组织制成匀浆，用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶（SOD），用硫代巴比妥酸法检测丙二醛（MDA），采用实时定量PCR 法检测肝组织中的 p53、p21 mRNA。结果治疗组大鼠注射骨髓间充质干细胞后3 d，荧光显微镜下可见带绿色荧光的骨髓间充质干细胞散在于肝脏内。光镜下观察，对照组大鼠肝细胞形态及结构正常，肝小叶结构正常；模型组大鼠肝组织水肿，细胞边缘不完整，肝索排列紊乱，肝小叶结构不清；与模型组比较，治疗组大鼠肝细胞形态较规则，肝小叶结构清晰，病理损伤减轻。与对照组相比，模型组大鼠肝组织中 SOD 水平降低，MDA 水平升高， p53、p21 mRNA 表达上调，血清 ALT、AST 水平升高（P 均＜0．05）。与模型组相比，治疗组大鼠肝组织中 SOD 水平升高，MDA 水平降低，p53、p21 mRNA 表达下调，血清 ALT、AST 水平降低（P 均＜0．05）。结论骨髓间充质干细胞静注能起到治疗 D-半乳糖诱导的大鼠肝损伤的效果，其机制可能与下调大鼠肝组织中 p53、p21 mRNA 表达及减轻肝组织氧化应激水平有关。