成年大鼠胰岛的分离纯化及体外培养

摘要

目的:探讨大鼠胰岛细胞分离纯化及体外培养方法. 方法:胆总管内逆行灌注胶原酶Ⅴ,分次短时间消化胰腺,Ficoll 400间断密度梯度法纯化胰岛,所得胰岛进行培养鉴定. 结果:大鼠胰腺消化后胰岛产量为1050±59个胰岛/胰腺, Ficoll 400纯化后产量为498±60个胰岛/胰腺,纯度可达70%,细胞存活率在93%以上,胰岛素释放试验显示高糖刺激后胰岛素释放量为低糖时的1.91倍,表明胰岛细胞功能良好.培养第13天,约有30%～40%胰岛存活,并具有完整的形态结构,胰岛素分泌量约降为最高值的30%.结论:该方法所得胰岛产量、纯度较高,功能良好,是一种较理想的胰岛细胞分离方法.普通培养条件适合胰岛的短期培养.