地被菊花Fall Color体细胞胚途径再生、遗传转化及转基因植株的抗寒性检测

摘要

[目的]培育耐寒性强的地被菊花[Dendranthema grandiflorum(Ramat.)Kitamura]新材料.[方法]以Fall Color品种的幼嫩叶片为外植体,探讨胚状体诱导所需的植物生长调节剂浓度和诱导培养时间等条件.[结果]叶片外植体在添加0.75 mg·L-1 2,4-D的诱导培养基上诱导15 d,再进行分生培养,不仅能够诱导胚性愈伤组织形成,还能够诱导胚状体发生,并进一步诱导芽再生,最终93%的供试外植体通过胚状体途径获得芽的再生.通过根癌农杆菌介导法将35S启动子驱动的逆境诱导转录因子DREB1A基因导入该品种.转化株在低温下的种子发芽率、扦插苗生长以及植株露地越冬生长状况等方面都明显优于对照.[结论]本研究成功地建立了地被菊花Fall Color体细胞胚再生途径,并成功地获得了具有越冬耐性的地被菊花转化株系.