根癌农杆菌介导的转录因子DREB1A基因在地被菊花中的遗传转化

摘要

以地被菊花(Dendranthemagrandiflorum cv.White Snow)无菌苗叶片为外植体,在附加不同浓度植物生长调节剂的MS基础培养基上诱导培养,通过器官直接发生途径获得再生植株.结果表明,2.0 mg/L 6-BA和0.2 mg/LNAA组合可获得93.8%的再生芽.将含拟南芥(Arabidopsisthaliana)逆境诱导转录因子DREB1A基因的植物表达载体pBI-DREBM导入根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)LBA4404,农杆菌介导法遗传转化地被菊花White Snow叶盘,经PCR和PCR-Southem检测,DREB1A基因已整合到转化植株的基因组中.遗传转化过程中,预培养2 d后,将OD600=0.5～0.7的根癌农杆菌稀释30倍后侵染叶盘10 min,再共培养2 d,有利于获得最高遗传转化效率.