再生植株

摘要： 以草原4号紫花苜蓿无菌苗为材料,选择直接和间接两种再生途径进行再生。结果表明:以下胚轴和子叶为外植体建立的间接再生体系,最优愈伤培养基为1mg/L 2,4-D+0.2mg/L KT,14d诱导率分别为100%和72.41%;最佳分化培养基为0.5mg/L 6-BA+0.9mg/L KT,60d后的分化率分别为88.89%和80.00%;不定芽接种到生根培养基(1/2 MS+0.1mg/L NAA+20g蔗糖+5.5g/L琼脂)40d后生根率可达73.30%;下胚轴为外植体的再生体系诱导愈伤和分化效果均优于以子叶为外植体。以子叶节为外植体建立直接再生体系,通过基础培养基就可获得再生植株,经55d培养就可炼苗移栽且生根率为84.44%。两种方法中,直接分化途径的再生体系更为高效省时,为后续遗传转化奠定了技术基础。

摘要： 为优化黄瓜未授粉子房培养高频胚诱导体系,以9个不同黄瓜基因型为试材,对影响未授粉子房培养胚发生和植株再生的因素进行研究,并对再生植株的倍性和同质性进行检测。结果表明,不同基因型之间出胚率差异显著,其中SG033出胚率最高,达95.93%,SG035出胚率最低,为8.15%;杂交种的胚胎发生能力显著高于产胚能力弱的亲本。在不同因素组合的处理中,处理11(秋季播种,定植于塑料大棚,盛花期取样,以开花前1 d的未授粉子房为外植体,4°C预冷处理4 d,接种于诱导培养基MS+0.08 mg·L^(-1)TDZ+30 g·L^(-1)蔗糖+7 g·L^(-1)琼脂,35°C热激暗处理2 d)的出胚率最高,比处理6、14、3分别提高了12.96%、30.00%、30.74%。采用形态学观察、流式细胞检测和SSR验证再生植株,分别获得了单倍体、二倍体、双单倍体及三倍体。综上所述,将产胚困难的黄瓜材料与产胚能力强的材料杂交后,用处理11进行子房培养能明显提高低出胚材料的诱导率。

摘要： 上海崇明地区冬季气温较低,松花菜制种生产中容易出现开花不结籽或结籽少等问题,为此作者筛选出6个符合育种目标的松花菜品种,并以其作为试验材料开展了再生植株培育及留种技术研究,以解决松花菜制种难的问题。该文分别研究了松花菜的定植期、割球时间、割球后管理对松花菜植株再生率的影响,并对比再生植株和小株作父本的制种效果。试验结果表明,再生植株主要适合早中熟松花菜品种(生育期小于80 d)的提纯和杂交制种;播种期应适当提早,建议生育期70~80 d的中熟品种宜在7月15日前播种、生育期50~60 d的早熟品种宜在7月25日前播种;花球采收后要及时清理根茎基部的老叶和病叶,早熟品种保留8张健壮叶片、中熟品种保留4~5张健壮叶片,留存的叶片长度以30 cm左右为宜;花球采收后,浇水施肥间隔时间为7~10 d;适时盖棚保温,最低气温在0°C以上时夜间不闭棚。

摘要： 小孢子培养已成为十字花科蔬菜育种工作中的一项重要应用技术。本文综述了十字花科蔬菜小孢子培养的研究进展,探讨了诱导小孢子成胚的内因和外因及胚状体转化成苗的影响因素,小孢子再生植株倍性鉴定方法及加倍方式,阐述了小孢子再生植株DH群体在抗病抗逆、基因定位、筛选突变体及新品种培育等方面的应用研究,并提出了相关问题和展望。

摘要： 以芍药(Paeonia lactiflora)品种粉玉奴花药为外植体,研究不同浓度2,4-D对愈伤组织诱导、体胚发生及植株再生的影响,采用组织细胞学方法观察愈伤组织以及体细胞胚发育过程,采用根尖染色体法鉴定再生植株倍性.结果 表明,芍药花药愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1 mg.L-12,4-D+1 mg·L-1 NAA+0.1 mg·L-1 KT+30 g·L-1蔗糖+6.5 g·L-1琼脂,愈伤组织诱导率为14.7％.转入体细胞胚诱导培养基上,历经球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚阶段,体胚诱导率为52.1％;在成苗培养基中能够长出真叶并得到完整植株,成苗率为47.1％.经根尖染色体法鉴定出单倍体和二倍体植株.该研究初步建立了通过体细胞胚间接发生途径实现植株再生的培养体系,可为芍药属其它品种的花药培养提供借鉴,获得的再生植株是芍药遗传学研究和育种工作的重要材料.

摘要： 甘蓝型油菜小孢子细胞诱导胚状体以子叶胚和非子叶胚如球形胚、心型胚和类似于胚的结构形态存在.子叶胚在成苗培养基上能够快速生长成植株,但是非子叶胚难以一次成苗,容易褐化死亡,因此减少非子叶状胚、培育高质量子叶胚是提高油菜小孢子再生成植株效率的关键步骤.为了提高甘蓝型油菜小孢子培养过程中诱导子叶胚的数目,对3个甘蓝型油菜品系分离得到的小孢子细胞在25°C下暗培养2周,之后转移到固液双层培养基上培养.通过对摇床的振荡周期、培养温度、固液双层培养基中活性炭的浓度以及6-BA不同梯度的处理,分析诱导子叶胚和非子叶胚发生的数目.结果显示,3个品系小孢子细胞在固液双层培养基上诱导得到的子叶胚数目显著高于液体培养基上诱导发生的数目.小孢子细胞在固液双层培养基上振荡培养1周所得子叶胚数目显著增加.降低小孢子培养温度至23°C,出胚总数和对照差异不显著,但子叶胚的数目显著增加.在固液双层培养基中的下层固体培养基中加入0.1％活性炭和0.25 mg/L 6-BA能够有效提高子叶胚的数目.此外,相比前人只用液体培养基培养的方法,本试验建立了两步培养方法(先液体培养后固-液双层培养)能有效获得子叶胚,从而快速生成植株,提高了甘蓝型油菜小孢子培养技术创制育种资源的效率.

摘要： 在添加NAA或2,4-D和6-BA的MS基本培养基中,以朱顶红品种"柠檬冰糕"(Hippeastrum hybridum'lemon sorbet')的花器官为外植体进行体外培养,分别从子房壁、花瓣、胚珠的培养中诱导出无菌植株,并对再生植株后期的生长表现进行几年的持续观察,认为花器官培养是最有效的朱顶红快速繁殖方式.

摘要： 以响叶杨叶片为外植体进行组培快繁,对外植体消毒、诱导培养、增殖培养、生根培养及炼苗移栽进行了深入研究,结果表明:0.10％升汞溶液最佳消毒时间为5.5 min;最佳诱导培养基为处理1-7(MS+1.00 mg·L-16-BA+0.10 mg·L-1 NAA),诱导率为90.0％;最佳增殖培养基为处理2-8(MS+0.40 mg·L-16-BA+0.15 mg·L-1 NAA),增殖倍数为4.0;适宜生根培养基为1/2 MS+0.10 mg·L-1 NAA,生根率为98.0％;炼苗后移栽选用树皮:珍珠岩:黄土=1:1:1的基质,成活率达92.0％.研究指出,通过芽苞嫁接、温室培育方法,有利于响叶杨野外采集的外植体脱毒.

摘要： 以南瓜胚囊再生植株为材料,采用形态学鉴定法、根尖染色体计数法和气孔保卫细胞叶绿体计数法3种方法对46株南瓜胚囊再生植株的倍性进行鉴定.结果表明:在46株再生植株中,有12株再生植株生长势弱、叶片较薄、叶脉不明显、分枝少、根系不发达,与其他倍性植株在形态上有明显差异;进一步进行染色体计数后,发现仅有7株再生植株的染色体数n=x=22,7株单倍体植株的保卫细胞叶绿体数的平均值为4.28个,正常二倍体组培苗的平均叶绿体数目为8.37个.说明形态学鉴定法只能作为倍性鉴定的一种辅助方法,而染色体计数法虽直接、准确,但是效率低,气孔保卫细胞叶绿体计数法高效、简便.

摘要： 西葫芦新品种多为杂交种，选育过程中，采用连续自交获得纯合自交系，其工作量大、周期长、效率低。单倍体育种技术倍受育种家的重视。离体诱导未受精子房或胚珠内的雌核发育获得双单倍体再生植株便成了迅速纯化育种材料的理想途径。西葫芦大孢子离体培养过程中,培养体玻璃化是再生植株形成的主要障碍之一.为保障西葫芦大孢子培养过程中胚状体的正常产生,减少培养体玻璃化对再生植株形成的影响,提高试管苗成活率.本试验通过4种培养基诱导胚状体形成筛选优良诱导培养基,通过对组织培养过程中环境温度、湿度、GA浓度等因子调整来降低培养体玻璃化的发生.结果表明:4种培养基均能不同程度诱导胚状体形成,其中D号B5+40g/LSuc+gg/LAgar+0.5mg/LNAA+0.05m g/LTDZ+30mg/LAgNO3培养基最佳(诱导出胚达96％),且直接生成76％不定芽;在培养温度为25°C,湿度85％,生根培养基GA浓度0.5mg/L条件下西葫芦大孢子培养体玻璃化发生率最低.

摘要： 目的:诱导过表达3-羟基-3-甲基戊二酰CoA还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase,HMGR)、鲨烯合成酶1(squalene synthetase1,SQS1)和β-香树脂醇合成酶(β-amyrin synthase,β-AS)基因的甘草再生植株.rn 方法:以植物双元表达载体pCAMBIA1305.1作为载体骨架,以HMGR、SQS1、β-AS基因作为目的基因,利用基因重组试剂盒eFusion Cloning Kit分别构建含有3个外源基因的重组载体,并将其转入根癌农杆菌EHA105中,采用根癌农杆菌介导法将目的基因转入甘草外植体中.rn 结果:获得了过表达HMGR、SQS1和β-AS基因的甘草愈伤组织及试管苗.rn 结论:过表达植物的成功诱导为进一步研究这三个功能基因过表达对甘草酸合成的影响奠定了基础.

摘要： 以月光枣花药愈伤组织为试材,经诱导不定芽途径获得了再生植株.MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+AgNO30.8mg/L+麦芽糖20g/L+琼脂55g/L培养基利于诱导枣花药愈伤组织发生不定芽,但再生植株全部为玻璃化状态.MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.4mg/L+麦芽糖20g/L+琼脂5.5g/L为最适月光枣玻璃苗继代培养基.玻璃苗恢复效果最好的培养基碳源组合为麦芽糖15g/L+蔗糖7.5g/L,玻璃苗恢复率可达50％.

摘要： 目的：探究当归愈伤组织诱导、增殖、胚状体分化和植株再生的条件,为当归工厂化育苗和转基因育种奠定基础. 方法：以胚轴和子叶为外植体,1/2MS或MS为基本培养基,添加不同浓度的蔗糖、不同种类和浓度的激素,诱导当归愈伤组织.研究不同的继代方法和次数、ABA、IBA及蔗糖浓度对愈伤增殖和胚状体分化的影响. 结果：愈伤组织第1-5次的继代及胚状体分化培养基可采用1/2MS+IBA2mg·L-1+3％蔗糖,愈伤组织第6次之后的继代和胚状体分化培养基可采用1/2MS+IBA2mg·L-1+KT0.2mg·L-1+3％蔗糖培养基,愈伤组织生长良好,但胚状体的分化量还有待进一步提高. 结论：建立了较为完善的当归胚状体再生植株的技术体系.

摘要： 以尾巨桉优良无性系无菌苗茎段为外植体,通过对噻唑基脲类新型分裂素(N-phenyl-N'-[6-(2-chlorobenzothiazol)-yl]urea,PBU)等多种不同浓度生长调节剂组合的优化,进行胚性愈伤组织诱导及再生研究.结果表明,在添加了2mg·L-1PBU和0.05mg·L-1IAA的改良MS培养基上,茎段外植体5d后愈伤组织诱导率达96％以上.将愈伤组织接种在添加1mg·L-16-BA和0.05mg·L-1NAA的MS培养基上,诱芽率达90.8％.随后在添加了0.8mg·L-1PBU与0.05mg·L-1IAA的1/2MS培养基上诱导芽伸长,用1/2MS培养基附加0.5mg·L-1IBA诱导生根,移栽后得到完整再生植株.

摘要： 基因工程技术已成为改良作物性状的重要手段.原生质体为受体的遗传转化是其中重要途径之一,但目前棉花在这方面的研究还很少.本研究以陆地棉C312(珂字312)为材料,分离胚性愈伤组织原生质体作为转化受体,选用绿色荧光蛋白(GFP)基因作为报告基因,电击穿孔转化法将外源质粒(pBINm-gfp5-ER)DNA转入棉花原生质体中,成功获得了4株转化植株.

摘要： 本文阐述了草莓再生脱毒植株的发展现状及意义;综述影响花药培养效果的各种因素如基因型、基本培养基、外源激素、糖种类及浓度、培养基添加物等;分析了花药再生脱毒植株技术存在的问题并展望了前景.

摘要： 本文阐述了草莓再生脱毒植株的发展现状及意义;综述影响花药培养效果的各种因素如基因型、基本培养基、外源激素、糖种类及浓度、培养基添加物等;分析了花药再生脱毒植株技术存在的问题并展望了前景.

摘要： 本文阐述了草莓再生脱毒植株的发展现状及意义;综述影响花药培养效果的各种因素如基因型、基本培养基、外源激素、糖种类及浓度、培养基添加物等;分析了花药再生脱毒植株技术存在的问题并展望了前景.

摘要： 本发明公开了一种适宜弱再生基因型甘薯茎尖培养植株再生的方法，属甘薯组织培养改良技术。选取弱再生基因型甘薯品种心香作为试验材料，选取薯块催生嫩芽为试验材料，在显微镜下剥取茎尖接种于一次性诱导植株再生培养基；在32°C下暗培养4-8天；然后在温度28±1°C、光照10小时/天条件下培养；待芽分化后，将其在35°C暗培养；植株再生后转入常规MS基本培养基、正常光照条件下进行繁殖培养。有益的效果：通过这一再生方法，弱再生基因型甘薯可以一步诱导成苗，并且再生率获得显著提高，均超过80.0％；植株再生的时间大大缩短，普遍为20-30d天，植株长势好，生长速度快；该方法可操作性强、重复性好。

摘要： 本发明公开了一种适宜弱再生基因型甘薯茎尖培养植株再生的方法，属甘薯组织培养改良技术。选取弱再生基因型甘薯品种心香作为试验材料，选取薯块催生嫩芽为试验材料，在显微镜下剥取茎尖接种于一次性诱导植株再生培养基；在32°C下暗培养4-8天；然后在温度28±1°C、光照10小时/天条件下培养；待芽分化后，将其在35°C暗培养；植株再生后转入常规MS基本培养基、正常光照条件下进行繁殖培养。有益的效果：通过这一再生方法，弱再生基因型甘薯可以一步诱导成苗，并且再生率获得显著提高，均超过80.0％；植株再生的时间大大缩短，普遍为20-30d天，植株长势好，生长速度快；该方法可操作性强、重复性好。

摘要： 本发明的光调控促进油茶带芽茎段植株再生的方法，包括S1消毒后带芽茎段接到诱导培养基并置于白光下，诱导培养基1/2MS+1.0mg·L‑16‑BA+0.01mg·L‑1NAA；S2将腋芽转移到增殖培养基中并置于红：蓝为4：1下，增殖培养基MS+1.0‑4.0mg·L‑16‑BA+0.01‑0.2mg·L‑1IBA；S3将腋芽转到壮苗培养基并置于红：蓝为4：1下养，壮苗培养基为1/2MS+5.0mg·L‑1GA3+0.01mg·L‑1IAA；S4将芽转到生根培养基并置于红：蓝为4：1，生根培养基：1/2MS；S5炼苗移栽。本发明具有腋芽诱导率高、增殖率高、出苗率高的效果。

摘要： 本发明公开了植株再生率高的路易斯安娜鸢尾组织培养繁殖方法，本发明涉及植株培养繁殖技术领域。该植株再生率高的路易斯安娜鸢尾组织培养繁殖方法，通过若干份叶肉组织分别放入培养皿内部，倒入3％等量的培养液，保持室内温度23°C‑27°C，将上述步骤中得到的嫩芽经无菌水的清洗后，接种至1/2MS培养基上进行培养，待萌芽生长至1.5CM‑2CM后，将其转入增值培养基中进行培养，将增值培养的组培苗从培养室取出放入培养瓶内，将培养瓶移送至温室中进行闭瓶练苗，练苗周期为7d‑8d，一个周期后向瓶体内部喷洒杀菌剂后重新封口，再放置一个周期，使得叶肉组织在培养皿中保持在7d‑8d即可发芽，一个培养周期内叶肉组织的再生率能够达到90％，有效的提升了植株的再生率。

摘要： 银水牛果幼茎再生植株诱导培养基及利用其进行植株培养的方法，本发明涉及再生植株诱导培养基及培养方法。本发明目的是为了解决现有银水牛果无性扦插法繁殖的生根率低，用MS培养基培养植株分化率低的技术问题。本发明的培养基由大量元素、微量元素、铁盐、有机质、激素、蔗糖和琼脂组成；其中的激素为6-苄基氨基嘌呤、玉米素和萘乙酸。方法：在4中旬～5月上旬，采集银水牛果的当年生休眠枝条，水培，得到幼茎；将幼茎清洗、消毒后接种银水牛果幼茎再生植株诱导培养基上，接种后，先放入黑暗条件下培养，然后转入光照培养，得到银水牛果再生植株。该培养方法的丛生苗诱导率达80%以上，同时节约成本约50%，种性纯度98%以上。

摘要： 本发明提供了一种杜仲各部位全株诱导植物再生及构建转基因植株再生体系的方法，属于木本植物组织培养技术领域。本发明提供的以杜仲各部位全株诱导植物再生的方法，包括如下步骤：以杜仲种胚、茎部和/或根部诱导获得愈伤组织，愈伤组织分化培养、生根培养获得完整的杜仲再生植株；所述分化培养的培养基为：基础培养基+0.5‑2mg/L6‑BA+1.0‑2.0mg/LIAA+25‑35g/L蔗糖+8‑10g/L琼脂，pH为5.8‑6。本发明提供的可以通过杜仲的根、茎、种胚多个部位进行植株再生的方法，具有更广泛的应用范围，可以根据需要，选择相应的部位进行再生，得到的组培再生幼苗具有相应的优良性状，培育出的组培苗苗龄，生长状态保持一致且良好，不易染菌，不易褐化，分化率和生根率较高。

摘要： 银水牛果幼茎再生植株诱导培养基及利用其进行植株培养的方法，本发明涉及再生植株诱导培养基及培养方法。本发明目的是为了解决现有银水牛果无性扦插法繁殖的生根率低，用MS培养基培养植株分化率低的技术问题。本发明的培养基由大量元素、微量元素、铁盐、有机质、激素、蔗糖和琼脂组成；其中的激素为6-苄基氨基嘌呤、玉米素和萘乙酸。方法：在4中旬～5月上旬，采集银水牛果的当年生休眠枝条，水培，得到幼茎；将幼茎清洗、消毒后接种银水牛果幼茎再生植株诱导培养基上，接种后，先放入黑暗条件下培养，然后转入光照培养，得到银水牛果再生植株。该培养方法的丛生苗诱导率达80%以上，同时节约成本约50%，种性纯度98%以上。

摘要： 本发明属于林木种苗培养技术领域，公开了一种樟子松植株再生的方法、低温再生的方法及其应用。所述再生的方法包括：以樟子松种子发育的带子叶下胚轴部分为外植体，经过壮苗后进行初代培养，促进外植体茎段生长和幼叶萌发；更换培养基比例进行继代培养，促进茎段上形成丛生侧枝；将侧枝取下再进行生根培养，进而获得再生植株。本发明优化了培养步骤；本发明将樟子松再生植株的时间缩短30d左右的培育时间，更好的将丛生芽的诱导率和生根率稳定在70％—80％之间。本发明保证了樟子松带子叶的下胚轴此类外植体扩繁后的再生植株能最大程度保留母株的抗性，保持亲本优良性状。

摘要： 本发明提供了一种杜仲各部位全株诱导植物再生及构建转基因植株再生体系的方法，属于木本植物组织培养技术领域。本发明提供的以杜仲各部位全株诱导植物再生的方法，包括如下步骤：以杜仲种胚、茎部和/或根部诱导获得愈伤组织，愈伤组织分化培养、生根培养获得完整的杜仲再生植株；所述分化培养的培养基为：基础培养基+0.5‑2mg/L6‑BA+1.0‑2.0mg/LIAA+25‑35g/L蔗糖+8‑10g/L琼脂，pH为5.8‑6。本发明提供的可以通过杜仲的根、茎、种胚多个部位进行植株再生的方法，具有更广泛的应用范围，可以根据需要，选择相应的部位进行再生，得到的组培再生幼苗具有相应的优良性状，培育出的组培苗苗龄，生长状态保持一致且良好，不易染菌，不易褐化，分化率和生根率较高。

摘要： 本发明公开了一种福鼎大白茶茶种诱导体细胞胚再生植株的方法，包括以下步骤：采摘刚长饱满的新鲜种子，带棕色种皮的茶种在超净台内脱毒灭菌处理后，剥去茶果的棕色种皮留下完整种子，以子叶结为中心，将中心5cm之外的子叶切去，胚根向下接种至培养基诱导体细胞胚；待体细胞胚诱导出来，观察其不能再继续膨大时，将其转移分化培养基上，体细胞胚上开始生芽，最终生成植株。本发明为茶树种质资源的离体保存提供无菌材料，也为后续茶树遗传转化和分子育种的开展提供技术参考。