间接竞争ELISA法检测坚果类过敏原特异性研究

摘要

以腰果蛋白为过敏抗原,腰果蛋白致敏的阳性小鼠血清作为一抗,羊抗鼠Ig E-HRP为二抗建立双抗体间接酶联免疫吸附实验（ELISA）体系,通过棋盘法确定腰果蛋白最佳反应条件工作浓度为15.92μg/m L,最佳一抗稀释度均为1∶400,最佳酶标二抗的稀释度为1∶1000,腰果蛋白浓度为1.99μg/m L。并用该方法分别对腰果、核桃、榛子、开心果、板栗、杏仁等六种坚果进行检测分析,未发现有交叉反应,本实验建立的间接竞争性ELISA诊断方法具有良好的敏感性和特异性,为坚果过敏性食品的监测及时而准确的诊断奠定了基础。