一种快速显色定量检测微生物样品中棒酸的方法

摘要

为满足从棒状链霉菌突变库中筛选棒酸高产株的需求，基于显色法原理设计了一种快速检测棒酸含量的方法．该方法的反应机制是β-内酰胺酶水解其黄色底物头孢硝噻吩（λmax=390nm），从而生成红色产物（λmax=486nm）．由于棒酸是β-内酰胺酶不可逆抑制剂，在上述反应中棒酸含量的高低将影响底物和产物的量，因此可以通过测定底物和产物的比值（A390／A486）最终测定棒酸的含量．本实验证实，该方法对棒酸的灵敏度为50μg／L，最佳检测窗口为0．05-10mg／L，且该方法的检测结果与HPLC法相关性很好．通过筛选一个小规模棒状链霉菌突变株库，证实该显色法可以快速识别和评价棒酸高产突变株．因此该方法若用于工业实践中的大规模突变株筛选，将节省大量的时间与人力．另外，还利用该显色反应开发了平板检测法，直接根据颜色差异定性判断平板菌落棒酸产量高低．该显色法是一种快速、方便、可靠的棒酸产量检测方法，适用于高通量筛选棒酸高产株．