两种玻璃化液冻存小鼠桑椹胚的研究

摘要

目的:研究EDS-40和EFS-40两种玻璃化溶液对小鼠桑椹胚冻存的影响.方法:随机选用NIH小鼠优质桑椹胚,先对两种玻璃化溶液EDS-40(40%乙二醇+18%葡聚糖+0.5 mol蔗糖)和EFS-40(40%乙二醇+18%聚蔗糖+0.5 mol蔗糖)行毒性测试;再在20℃±5℃室温下,将小鼠桑椹胚分别加入到两种玻璃化溶液,玻璃化后装管并迅速投入液氮中,冻存2-3个月.各组均在25℃的水浴中复温,胚胎用解冻液(S-PBS)和培养液反复洗涤后移入含Ham's F12培养液培养48 h,观察胚胎形态及发育.部分胚胎体外培养12-14 h后行胚胎移植,观察妊娠及产仔情况.结果:两种玻璃化溶液的毒性有显著性差异,EDS-40较EFS-40毒性低(X2=6.415,P＜0.05),透明带完好率两组间无显著性差异(X2=2.189,P＞0.05).胚胎优良率(X2=7.51,P＞0.01)和发育率(X2=5.556,P＜0.05)EDS-40较EFS-40更好,两组间妊娠率(X2=1.937,P＞0.05)及产仔率(X2=0.245,P＞0.05)无显著性差异.结论:EDS-40较EFS-40玻璃化溶液毒性低,冻存胚胎效果更好.