缺氧诱导因子-1α在早期糖尿病大鼠视网膜神经细胞中的表达

摘要

目的研究缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在早期糖尿病大鼠视网膜中的表达,以探讨其在糖尿病性视网膜神经细胞病变发生及发展中的作用.方法用链脲佐菌素制作糖尿病大鼠模型,在制模成功后1周、2周、4周、6周、8周、10周及12周取眼球组织,以年龄匹配正常大鼠作为对照组,分别以免疫组织化学染色及Western blotting方法检测视网膜组织中HIF-1α表达的位置及表达量;同时,以Real-time RT-PCR方法检测视网膜组织中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的mRNA表达水平.结果糖尿病模型诱导成功后1周,视网膜组织即有HIF-1α表达,主要位于节细胞层及内核层的细胞核内,4周时阳性细胞数大于1周(12.34±0.41 vs 9.32±0.74),6～10周达到高峰(分别为16.51±0.35,45.33±0.52和37.31±0.43),12周下降(9.82±0.54).Western blotting显示HIF-1α蛋白表达模式与免疫组织化学相似,1周时即有表达,6～10周达到高峰,12周下降.Real-time RT-PCR结果显示视网膜组织VEGF的mRNA水平在基础状态下少量表达,糖尿病诱导成功后表达水平逐渐提高,8周达到高峰,之后开始下降.结论 HIF-1α及其下游基因VEGF在早期糖尿病视网膜神经细胞中的瞬时高表达而不是持续表达,可能是早期糖尿病视网膜神经细胞损害的原因.