超声联合靶向微泡介导EGFP基因转染脉络膜新生血管

摘要

目的 探讨超声联合靶向微泡介导增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因转染脉络膜新生血管(choroidal neovasculafization,CNV)的可行性和应用价值.方法 BN大鼠通过半导体倍频激光(波长为532 nm)光凝方式建立CNV模型.实验分为7组:对照组、单纯超声辐照组、靶向微泡+超声辐照(TM+us)组、裸质粒(P)组、质粒+超声辐照(P+US)组、质粒+靶向微泡(P+TM)组、质粒+靶向微泡+超声辐照(P+TM+US)组.光凝后7 d,实验组鼠尾静脉注入EG-FP质粒和靶向脂质体微泡的复合物.处理7 d后摘除眼球行冰冻切片,激光共聚焦显微镜下观察CNV EGFP基因表达效率.结果 对照组、单纯超声辐照组及TM+us组脉络膜无荧光表达.P组和P+us组脉络膜血管呈弱荧光表达,CNV荧光强度分别为22.49±4.61和26.87±6.73,和正常脉络膜血管荧光表达强度比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05).P+TM组和P+TM+US组可见CNV有强荧光表达,CNV荧光强度分别为76.82±12.88和235.08±34.55,而脉络膜正常血管仅呈弱荧光.P+TM+US组CNV荧光表达最强.结论 超声联合靶向微泡可高效、靶向地将质粒DNA输送至CNV.这种非侵入性的技术在CNV基因治疗上可能有很好的前景.