低频超声联合微泡介导pEGFP-N1基因转染前列腺癌细胞的实验研究

摘要

第一部分低频超声不同功率超声辐照对前列腺癌细胞膜通透性的体外实验研究
　　 目的：探讨低频超声不同功率超声辐照对前列腺癌细胞膜通透性的影响。
　　 方法：应用低频超声治疗仪（频率21KHz）辐照前列腺癌PC-3 细胞悬液。实验分为空白对照组、超声组（根据声功率不同分为5 组，分别为6.6mW、26.6mW、61.1mW、104mW、184mW组）。超声组在超声辐照场中辐照5min，占空比20％。辐照后应用荧光显微镜观察FD500 进入细胞的情况，并检测FD500 染色阳性率，应用台盼蓝染色检测细胞死亡率。
　　 结果：1.细胞FD500染色阳性率结果：超声辐照组中在声功率达到61.1mW 之前，随声功率的增加细胞FD500 染色阳性率逐渐增加，声功率达到61.1mW 之后细胞FD500染色阳性率未见明显改变2. 台盼蓝染色检测的细胞死亡率：随着声功率增加细胞死亡率也逐渐增加。结论：低频超声不同声功率辐照能对前列腺癌细胞膜产生通透性。但不同声功率产生细胞膜的通透性不同。
　　 第二部分低频超声联合微泡介导pEGFP-N1基因转染前列腺癌细胞的实验研究
　　 目的：探讨低频超声联合微泡介导pEGFP-N1基因转染前列腺癌细胞的可行性，并观察联合脂质体对基因转染的影响。
　　 方法：应用超声治疗仪（频率21KHz）辐照前列腺癌PC-3 细胞悬液。实验分为空白对照组、超声组、微泡组、微泡+超声组、脂质体组、脂质体+超声组、超声+微泡+脂质体组，其中超声+微泡+脂质体组根据微泡体积浓度不同分为6 个亚组，分别为0％组、10％组、20％组、30％组、40％组、50％组。超声处理均为将不同成分细胞悬液在超声辐照场中辐照5min，占空比20％，声功率61.1mW。超声辐照完毕后立即将细胞悬液（最后留100μl 细胞重悬液用台肦蓝染色检测细胞死亡率）转移到12 孔培养板中培养4h，换液后继续培养48h 应用荧光显微镜观察细胞基因转染情况，以检测基因转染的百分率。
　　 结果：在不同组别的基因转染中除对照组与微泡组比较差异无显著性意义外，其余各组间两两比较差异均有统计学意义(p<0.05)；其中超声+微泡+脂质体组转染率最高，其次为脂质体+超声组。在超声+微泡+脂质体亚组中，在微泡浓度增加到20％之前，基因转染率随着微泡浓度增加而增加，微泡浓度到20％之后，随着微泡浓度的增加基因转染率反而下降，而细胞死亡率一直随微泡浓度的增加而增加。
　　 结论：低频超声联合微泡介导pEGFP-N1 基因在前列腺癌细胞中能有效转染。超声联合微泡造影剂能有效增强脂质体介导pEGFP-N1 基因在前列腺癌细胞的转染率。

目录

绪论

第一部分低频超声不同功率辐照对前列腺癌细胞膜通透性的体外实验研究

第二部分低频超声联合微泡介导pEGFP-N1基因转染前列腺癌细胞的实验研究

全 文 总 结

综 述

致 谢

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