超声靶向微泡破裂联合PEI增强小鼠EGFP基因心肌转染

摘要

目的 探讨超声靶向微泡破裂(UTMD)联合聚乙烯亚胺(PEI)增强BALB/c 小心肌绿色荧光蛋白基(EGFP)转染的可行性和应用价值.方法 实验分为7组:PBS组、裸质粒组、质粒+超声辐照组(P+us)、质粒+SonoVue+超声辐照组(P+UTMD)、质粒+PEI组(P+PEI)、质粒+PEI+超声辐照组(P+PEI+US)、质粒+PEI+SonoVue+超声辐照组(P+PEI+UTMD).由BALB/c小鼠尾静脉注入EGFP质粒和SonoVue微泡或PEI的复合物,处理4 d后检测心肌基因表达效率及HE染色,并对超声辐照后的质粒完整性进行分析.结果 电泳显示超声辐照不会损坏DNA或PEI/DNA复合物.非超声辐照时,EGFP只在心内膜下层表达;而超声辐照时,表达最强的位置为靠近探头的左室前壁;超声联合PEI时,EGFP的分布差异不明显.P+PEI+UTMD组的转染率最高,荧光强度最强.结论 UTMD联合PEI可高效、靶向地将质粒DNA输送至心肌,这种非侵入性的技术在心脏基因治疗上很有前景,有望应用于迅速发展的心脏病基因疗法.