胰岛素样生长因子结合蛋白-6对RPE细胞增殖和迁移的影响

摘要

目的 探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-6(insulin-like growth factor binding protein-6,IGFBP-6)对视网膜色素上皮(retinal pigmented epithelium,RPE)细胞增殖和迁移的影响.方法 用IGF-Ⅱ(50 mg·L-1)、PDGF( 20 mg·L-1)、VEGF(40 mg·L-1)和TGF-β(4 mg·L-1)干预ARPE-19细胞6h,以诱导细胞增殖,再加入不同浓度IGFBP-6(1 mg·L-1、10 mg·L-1、100 mg·L-1、500 mg·L-1、1000 mg·L-1)作用24h、48 h后,通过MTS实验观察OD值的变化,研究IGFBP-6对细胞增殖的影响.细胞划痕实验分为IGF-Ⅱ组(50 mg·L-1)、IGF-Ⅱ+IGFBP-6组(含IGF-Ⅱ50 mg·L-1和IGFBP-6 500 mg·L-1)、无血清培养液组的实验,细胞划痕24 h、48 h后,计算各组细胞移行愈合率的变化,从而研究IGFBP-6对细胞迁移的影响.结果 MTS比色法显示一定浓度的IGFBP-6(100 mg·L-1、500 mg·L-1、1000 mg·L-1)可以抑制IGF-Ⅱ诱导的ARPE-19细胞增殖(P＜0.05),各浓度IGFBP-6对PDGF、VEGF、TGF-β诱导的细胞增殖均无明显影响(均为P＞0.05);细胞划痕实验显示,IGF-Ⅱ组、IGF-Ⅱ+IGFBP-6组、无血清培养液组的细胞移行愈合率[分别为(24 h:43.91％±3.85％、29.76％±2.49％、26.12％±2.33％;48 h:66.09％±1.67％、59.88％±3.43％、57.05％±2.49％)]差异均有统计学意义(均为P＜0.05).结论 IGFBP-6能够抑制IGF-Ⅱ诱导的RPE细胞增殖和迁移.