莱菔硫烷对高糖条件下大鼠晶状体上皮细胞活性氧产生与线粒体膜电位的影响及机制研究

摘要

目的 观察莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对高糖条件下大鼠晶状体上皮细胞(lens epithelial cell,LEC)活性氧(reactive oxygen species,ROS)和线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)的影响,并探讨其可能的分子机制.方法 人LEC系SRA01/04细胞分别用含5.5 mmol·L-1葡萄糖(正常对照组)和30.5 mmol·L-1葡萄糖(高糖处理组)的培养基培养.SFN干预组在高糖处理组培养基基础上加入不同浓度SFN.处理24h后,荧光探针法检测ROS产生量,罗丹明123染色检测MMP的改变,Western blot观察血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的表达.为了评价SFN对LEC的保护作用与HO-1的关系,SFN干预组(30 μmol·L-1)中分别加入不同浓度的HO-1激动剂钴原卟啉和抑制剂锡原卟啉,24h后观察ROS产生量及MMP变化.结果 与正常对照组相比,高糖处理组LEC中ROS的产生量增加了29.0％,差异有统计学意义(P＜0.05)；SFN干预组ROS的产生量随着SFN浓度的增高而逐渐降低,当SFN浓度为30 μmol·L-1时,ROS产生量接近正常对照组,差异无统计学意义(P＞0.05).高糖处理组MMP水平与正常对照组相比下降了61.0％,差异有统计学意义(P＜0.05),30μmol·L-1 SFN使MMP水平恢复到95.4％,与高糖处理组相比,差异有显著统计学意义(P＜0.01).高糖处理组HO-1表达轻微增加；SFN干预组与高糖处理组相比HO-1表达进一步增高.HO-1特异性抑制剂锡原卟啉能减弱SFN对ROS的抑制作用并降低MMP水平,而HO-1激动剂钴原卟啉则能进一步协同SFN降低高糖诱导的ROS产生,并提高MMP水平.结论 SFN能在一定程度上抑制高糖诱导的人LEC内ROS产生及MMP改变,机制可能与其诱导HO-1的表达有关.