过氧亚硝酸根联合碱性成纤维细胞生长因子对人晶状体上皮细胞细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化水平的影响

摘要

目的 探讨过氧亚硝酸根(peroxynitrite,ONOO-)和重组人碱性成纤维细胞生长因子(recombinant human basic fibroblast growth factor,bFGF)共同作用对人晶状体上皮细胞细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化水平的影响.初步探讨ONOO-导致白内障发生的可能机制.方法 将培养的HLEC细胞分为4组,对照组(未经ONOO-和bFGF处理)、bFGF单独处理组、bFGF+ONOO-处理组[bFGF预处理1h后加入不同浓度ONOO-(50 μmol·L-、100μmol·L-1、200 μmol·L-1)处理1 h]和ONOO-+ bFGF处理组[不同浓度ONOO-(50 μmol·L-1、100 μmol· L-1、200 μmol·L-1)预处理1h后加入bFGF处理1h].检测各组细胞内ERK磷酸化水平的变化.结果 bFGF单独处理组和bFGF+ONOO-(50 μmol·L-1、100 μmol·L-1、200 μmol·L-1)处理组中磷酸化ERK相对表达值分别为5.17±0.35、4.42±0.12、3.91±0.15和0.49±0.08,与对照组(1.00±0.05)相比差异有统计学意义(F=402.83,P＜0.001),结果显示ONOO-可以抑制由bFGF诱导的ERK磷酸化水平的增加(F=310.34,P＜0.05).ONOO-(50 μmol·L-1、100 μmol·L-1、200 μmol·L-)+ bFGF处理组中磷酸化ERK相对表达值分别为3.36±0.04、3.32±0.06和2.92±0.08,与对照组(1.00±0.02)相比,所有处理组的ERK磷酸化水平均显著增加(F=518.94,P＜0.001);50 μmol·L-1和100 μmol·L-1ONOO-处理细胞后经bFGF处理,ERK磷酸化水平较bFGF单独处理组(3.04±0.05)显著增加(F=35.53,P＜0.05),而200 μmol·L-1 ONOO-处理组与bFGF单独处理组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ONOO-诱导的白内障的发生可能与ERK磷酸化的紊乱有关.