Folin-Ciocalteu比色法测定茶酵素中多酚含量的方法学研究

摘要

探索优化Folin-Ciocalteu比色法测定茶酵素中多酚含量的前处理及反应条件。以吸光度为评价指标,考察了预处理样品溶液pH、醇沉法去除低聚糖对茶酵素中多酚测定结果的影响。通过测定波长、呈色反应体系中主要反应液的用量、反应时间和显色温度,以没食子酸为对照品,优化测定固态和液态酵素样品中多酚含量的最佳反应条件。通过试验确定Folin-Ciocalteu比色法的最佳反应条件为:预处理溶液pH≤4.0,去除低聚糖,10%Folin-Ciocalteu试剂7.0 mL、7.5%Na_(2)CO_(3)溶液5.0 mL、温度30℃、避光反应90 min,最佳波长750 nm,没食子酸浓度的线性范围为5~50μg/mL(R^(2)=0.9996)。液态与固态样品平均回收率分别为98.8%、96.6%;RSD为1.69%、1.68%。优化后的方法简单方便、稳定性好、精密度高、结果准确可信,可有效用于酵素产品中多酚含量的检测。