亚洲柑橘黄龙病的实时荧光PCR检测方法比较研究

摘要

柑橘黄龙病号称柑橘的"癌症",早发现、早诊断是防止该病蔓延的重要手段.近年来发展了一系列针对该病的实时荧光PCR (real-time quantitative PCR,qPCR)检测方法,但方法间的比较研究尚无报道.本研究以感染亚洲黄龙病的柑橘叶片为材料,对6组柑橘黄龙病qPCR检测所用引物探针进行比较,包括特异性和检出限及在数字PCR(digital PCR,dPCR)中的适用性.结果 显示,这6组引物探针对黄龙病的检验特异性良好;灵敏度稍有差别,依次为Las＞CLIB 11=CLIB 9＞CLIB 12＞CLIB 4＞rpll;CLIB 9在dPCR反应中相对于其他引物雨滴现象严重,因此不宜选取做后续实验.Las、CLIB 11都适用于dPCR反应,相比之下CLIB 11热图略好一些.本研究为今后黄龙病鉴定方法的选择提供了参考.