成年小鼠生精小管及睾丸的冷冻保存

摘要

采用含不同浓度抗冻剂二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇(EG)、丙二醇(PG)及丙三醇(G)的DMEM培养基作为冻存液,对成年小鼠生精小管及完整睾丸进行慢速冷冻,液氮保存,37 ℃水浴复苏,并测定细胞复苏率.结果表明,成年小鼠生精小管在50 mL/L、100 mL/L及150 mL/L DMSO冻存液中的细胞复苏率分别为92.6%、93.4%及69.4%,在50 mL/L、100 mL/L及150 mL/L PG冻存液中的细胞复苏率分别为94.2%,93.3%及66.9%,在50 mL/L、100 mL/L及150 mL/L EG冻存液中的细胞复苏率分别为87.2%、91.0%及62.6%,在50 mL/L、100 mL/L及150 mL/L G冻存液中的细胞复苏率分别为90.0%、90.5%及67.1%.各种抗冻剂的最高细胞复苏率之间差异不显著(P>0.05).成鼠完整睾丸在含100 mL/L DMSO、PG、EG或G的冻存液中的细胞复苏率分别为56.0%、50.0%、50.2%及50.2%.结果显示,DMSO、PG、EG及G均适宜用作成年小鼠生精小管的抗冻剂,最佳使用浓度均为50 mL/L～100 mL/L.完整睾丸冷冻后的细胞复苏率低于60%,仍需进一步研究.