猪IL-2和IL-6的原核表达及多克隆抗体的制备

摘要

IL-2和IL-6是机体重要的免疫调节因子,在佐剂的应用方面具有很好的发展前景.论文以pTIL-2和pTIL-6为模板进行PCR扩增得到猪白细胞介素2(pIL-2)和猪白细胞介素6(pIL-6)的全基因序列,通过EcoRⅠ和HindⅢ双酶切及连接反应将目的基因亚克隆到原核表达载体pET30a中构建了融合表达质粒pETIL-2和pETIL-6.将重组质粒分别转化大肠埃希菌BL21(DE3)和Rosetta(DE3),37 ℃在IPTG诱导下高效表达了pIL-2和pIL-6,分子质量分别约为26 ku和30 ku.将包涵体纯化并复性后免疫家兔,制备的兔抗pIL-2和pIL-6的多克隆抗体经ELISA检测效价在1:12 800以上.