黄瓜花叶病毒卫星RNA的cDNA双体基因的构建

摘要

以限制性内切酶BamHI和SmaI切割克隆于pUC12上的CMV卫星RNA的cDNA片断(pUI)并补齐、回收,将此片断重组于pUI(SmaI酶切暴露出Sat 3′末端)上构建成卫星双体前体克隆(pUI-I)。双体前体片断亚克隆于M13 mp19上,以合成的点突变引物,采用Kunkel等的方法定点突变除去双体前体中两单体之间多出的7个碱基,从而得到卫星RNA双体基因。