下调UCA1通过靶向miR-23b及其下游靶基因抑制胃癌细胞的增殖和转移

摘要

目的:探讨长链非编码RNA尿路上皮癌相关基因1(UCA1)调控胃癌细胞增殖和转移的分子机制.方法:将人胃癌细胞株SGC7901分为:对照组、siRNA-NC组、siRNA-UCA1组、inhibitor-NC组和miR-inhibitor组、si-UCA 1+inhibitor-NC组和si-U-CA1 +miR-inhibitor组.对SGC7901细胞分别转染siRNA-UCA1及阴性对照(siRNA-NC)、miR-inhibitor及阴性对照(in-hibitor-NC),未转染的细胞作为对照组.通过RT-qPCR检测细胞中UCA1和miR-23b-3p的水平.通过CCK-8法、伤口愈合实验和Transwell实验评价细胞的增殖、迁移和侵袭能力.通过Western blot分析细胞中IL6R、BCL2和HSP90B1蛋白的表达.使用pcDNA-UCA 1/pcDNA-NC与pGL3-miR-23b-3p-WT/pGL3-miR-23b-3p-Mut共转染细胞,通过双荧光素酶报告实验验证UCA1与miR-23b-3p的靶向关系.结果:细胞培养48 h和72 h后,与对照组比较,siRNA-UCA1组的细胞活力分别降低了31.58％和31.40％(P＜0.05).与对照组比较,siRNA-UCA1组的细胞迁移率[(61.46± 5.43)％ vs (23.16± 3.17)％]、侵袭细胞数量(109.17±9.66 vs 50.83±6.96)、IL6R、BCL2和HSP90B1的蛋白相对表达量均显著降低,而miR-23b-3p相对表达量升高(P＜0.05).与pGL3-miR-23b-3p-WT共转染后,与pcDNA-NC组比较,pcDNA-UCA1组的相对荧光酶活性降低了66.12％(P＜0.05).与si-U-CA1 +inhibitor-NC组比较,si-UCA1 +miR-inhibitor组的细胞活力、细胞迁移率、侵袭细胞数量、IL6R、BCL2和HSP90B1的蛋白相对表达量均显著升高(P＜0.05).结论:下调UCA1通过靶向miR-23b-3p及其下游基因IL6R、BCL2和HSP90B1来抑制胃癌细胞的增殖和转移.