高胱氨酸尿对大鼠肾脏自噬水平的抑制作用

摘要

目的:探讨胱氨酸尿症中高胱氨酸浓度对大鼠肾脏自噬水平的影响.方法:通过液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)测定Slc7a9基因敲除大鼠24小时尿液胱氨酸浓度确定高尿胱氨酸;通过IHC(免疫组织化学)染色筛选无结石产生的胱氨酸尿症大鼠、观察肾脏组织结构有无明显变化;通过Western blot测定肾脏组织中的LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、p62和mTOR的蛋白相对表达量,以检测自噬水平的变化,并探索变化原因;通过组织切片Masson染色法检测肾脏髓质纤维化程度.结果:10只无结石胱氨酸尿症大鼠尿液胱氨酸显著高于对照组;未发现有胱氨酸结石的生成与肾脏结构性变化;Masson染色提示胱氨酸尿症大鼠发现轻度肾脏纤维化过程;肾脏组织自噬标记蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ蛋白相对表达量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值以及自噬当量p62相对表达较对照组均显著降低,mTOR相对表达量显著升高.以上差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:在胱氨酸尿症大鼠模型上,发现无结石形成情况下的尿高胱氨酸水平可通过mTOR途径抑制大鼠肾脏组织的自噬水平,自我保护作用减弱,由此参与胱氨酸尿症的肾脏损伤过程.