狂犬病病毒aG株全基因组序列测定及遗传稳定性分析

摘要

目的 探究狂犬病病毒(Rabies virus,RV)aG株全基因组序列特征及遗传稳定性.方法 严格按疫苗生产工艺进行传代,提取主种子批、工作种子批及疫苗原液病毒RNA,通过RT-PCR技术扩增全基因组各片段基因,然后分别将其克隆到pGEM-T载体中,并进行序列测定;采用DNAStar软件包对aG株与GenBank中4aGV参考株(JN234411)以及18株基因1型RV参考株进行同源性分析.结果 aG株全基因组由11 925个核苷酸组成,共编码3 600个氨基酸.疫苗原液与主种子批全基因组核苷酸和氨基酸同源性均为100％,而工作种子批与主种子批的核苷酸与氨基酸同源性分别为99.97％和99.92％;aG株与4aGV参考株全基因组核苷酸与推导的氨基酸同源性均为99.9％,其与18株基因1型参考株核苷酸与氨基酸序列同源性分别为84.2％ ～ 97.6％和93.7％ ～98.3％;aG株传代病毒与4aGV参考株全基因组氨基酸序列高度保守,且各主要功能区未发生变异.结论 狂犬病病毒aG株在实验室长期生产传代过程中,全基因组遗传特性稳定.