miR-21靶向调控PDCD4对皮肤鳞状细胞癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响

摘要

目的 检测皮肤鳞状细胞癌(cSCC)中miR-21和程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的表达,分析两者靶向关系及其对cSCC细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡等生物学行为的影响.方法 以人正常皮肤细胞系HaCaT为对照,RT-PCR检测cSCC细胞A431、HSC-5、SCL-1中miR-21和PDCD4表达情况.将miR-21抑制剂(miR-21 inhibitor)、PDCD4过表达载体(OE-PDCD4)、PDCD4干扰载体(si-PDCD4)转染至A431、SCL-1细胞中,RT-PCR检测miR-21表达;Western blot检测PDCD4蛋白表达;MTT实验、细胞划痕实验、Transwell实验、流式细胞仪检测转染miR-21 inhibitor、OE-PDCD4、si-PDCD4后对细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响;生物信息学软件和荧光素酶实验预测并验证miR-21与PDCD4之间的靶向关系.结果 A431、HSC-5、SCL-1细胞中miR-21表达均上升,PDCD4表达均下降,以A431、SCL-1细胞变化最为显著,差异均有统计学意义(P<0.05).抑制miR-21或上调PDCD4的表达后,A431、SCL-1细胞的增殖、迁移、侵袭能力下降,凋亡能力上升,差异均有统计学意义(P<0.05).干扰PDCD4表达则促进A431、SCL-1细胞的增殖、迁移、侵袭,抑制其凋亡.生物信息学软件和荧光素酶实验证明PDCD4是miR-21的靶基因.结论 cSCC细胞中均存在有miR-21的高表达和PDCD4的低表达,且miR-21能够靶向负调控PDCD4表达,抑制miR-21表达后,cSCC细胞的增殖、迁移、侵袭能力均下降,细胞凋亡率上升.其作用可能与miR-21靶向调控PDCD4的表达有关.