改良FIASCO方法筛选砷超富集植物蜈蚣草SSR分子标记

摘要

蜈蚣草(Reris vittata L.)是目前用于砷污染土壤修复最好的超富集植物,但其分子水平上的研究数据较少.为了开发蜈蚣草特异性SSR遗传标记,本文采用改良的FIASCO方法从蜈蚣草AG和AC微卫星富集文库中随机挑选100个克隆,分离得到51个微卫星位点,其中60％为完美型(Perfect) SSR.根据这些位点设计、合成了25对引物,并对江西庐山及湖北恩施两地蜈蚣草种群各20个个体进行了遗传多样性检测,结果发现:其中8个完美型及1个间断型(intermittent) SSR位点的引物能够扩增出清晰、稳定且具有多态性的条带.9对引物共扩增出41个等位基因,各位点等位基因数在2～7之间,平均等位基因数为4.56个;期望杂合度在0.0494 ～ 0.8169之间;没有连锁不平衡现象发生.采用大叶井栏边草(Pteris multifida Poir.)进行跨种扩增,结果发现其中6对引物能够进行种间扩增.这些SSR分子标记的开发有助于蜈蚣草生态适应性进化分析、揭示蜈蚣草地理分布格局以及探讨蜈蚣草遗传多样性,还可用于品种鉴定及选育等.