液相色谱-质谱法同时测定大鼠血浆中游离型神经甾体

摘要

目的建立同时测定SD大鼠血浆中脱氢表雄酮(DHEA)、孕烯醇酮(PREG) 和别孕烯醇酮(AP)的高效液相色谱-质谱法.方法选择甲睾酮(MT)作为内标.雄性SD大鼠的血浆使用液液萃取后,再经固相萃取、衍生化后,以高效液相色谱质谱检测器测定DHEA、PREG 和AP的浓度.采用大气压化学离子源(HPLC/APCI-MS),选择离子检测方式.结果血浆中DHEA、PREG 和AP线性范围分别为:0.030～2.00ng·ml-1,0.025～2.00ng·ml-1,相关系数分别为0.998 8、0.999 6和0.998 8.低、中、高浓度血样的提取回收率在70.4%～92.4%之间,相对回收率为:92.6%～105.6%,日内、日间RSD均小于15%.正常雄性SD大鼠的血浆PREG 和AP分别为0.29±0.24ng·ml-1、0.19±0.20ng·ml-1,每ml血浆DHEA含量均低于定量限.结论本实验方法具有灵敏度高、准确度好及变异较小的特点,适合测定雄性SD大鼠血浆中3种游离型神经甾体的含量.