太平洋鳕鱼脑中硫苷脂的分离纯化和分析

摘要

以太平洋鳕鱼为原料,从鳕鱼脑中分离硫苷脂,确立了提取及纯化的条件,并对硫苷脂的纯度和分子种进行分析.首先,采用氯仿/甲醇(2∶1,v/v)提取总脂.然后,依次采用氯仿/甲醇/水(7∶3∶0.3,v/v/v)洗脱硅胶柱层析,含0.2mol/L乙酸铵的氯仿/甲醇/水(30∶60∶8,v/v/v)洗脱DEAE Sephadex-A25离子交换柱层析,40％甲醇脱盐和100％甲醇洗脱反相C8柱层析,获得硫苷脂纯品.最后,利用500YMC Diol液相色谱柱(3.0 mm× 250 mm,5 μm)分离,以正己烷/异丙醇(70∶ 30,v/v),异丙醇/水/甲酸/氨水(100∶ 13∶1∶0.14,v/v/v/v)为流动相梯度洗脱,采用负电喷雾电离(ESI)和母离子扫描模式,用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法分析了鳕鱼脑硫苷脂的纯度和分子种组成,并比较了其与哺乳动物脑中硫苷脂分子种组成的异同.结果表明,本实验制得的鳕鱼脑硫苷脂纯度为90.74％,与哺乳动物类似,鳕鱼脑硫苷脂的长链碱基以鞘氨醇为主,主要分子种为d18∶1-C24∶1,但脂肪酸的羟基化程度略低,且含少量独特的分子种,如d18∶1-22∶1和d18∶ 2-25∶2.