正交设计直观分析法优化苦瓜SSR-PCR反应体系

摘要

以苦瓜‘MC9,为试材,采用L16(45)正交实验,对苦瓜SSR-PCR反应体系的Mg2+浓度、dNTPs浓度、模板DNA量、Taq聚合酶量、引物浓度等5个因素的4个水平进行优化试验,并通过正交设计直观分析法对Md2+浓度、dNTPs浓度、Taq聚合酶量进行了单因素确定.结果表明:最佳反应体系为1μL 10×PCR buffer,Mg2+浓度为1.75 mmol·L-1,dNTPs浓度为0.25 mmol·L-1,Taq DNA聚合酶1U,DNA 100 ng,引物0.20 mmol·L-1,ddH2O补足至10 μL.