腺病毒介导的凝血酶敏感蛋白1抗血管新生衍生物基因转移抑制K562细胞裸鼠体内生长

摘要

目的探讨腺病毒介导的凝血酶敏感蛋白1(thrombospondin 1,TSP1)抗血管新生衍生物(TSP1f)基因转移对人白血病细胞株K562裸鼠移植瘤的抑制活性及作用机制.方法应用RT-PCR方法从正常人外周血单个核细胞扩增TSP1f cDNA序列;采用AdEasy系统构建TSP1f重组腺病毒ADV-TSP1f;用Western印迹方法检测ADV-TSP1f介导的TSP1f在K562细胞中的表达;18只皮下移植瘤模型小鼠分为3组,分别于移植瘤内注射109 pfu ADV-TSP1f、109 pfu ADV-LacZ及PBS观察对K562裸鼠体内生长的抑制作用;用免疫组化方法比较移植瘤内微血管密度(MVD).结果 K562细胞经ADV-TSP1f感染可高效表达/分泌TSP1f多肽;治疗后3周ADV-TSP1f治疗组移植瘤体积为(1 108 mm3±179 mm3),远小于ADV-LacZ组(4 518 mm3±452 mm3)及PBS组(4 666 mm3±458 mm3),(P<0.01);每×200倍视野中,ADV-LacZ、PBS及ADV-TSP1f治疗组组织切片内CD31阳性血管内皮细胞平均数分别为36±7, 34±9和14±4.结论 ADV-TSP1f可显著抑制K562细胞裸鼠体内生长,有望成为治疗恶性肿瘤包括造血系统恶性肿瘤有效的基因治疗药物.