碱性成纤维细胞生长因子对大鼠脊髓牵张损伤后Caspase 3基因表达的影响

摘要

目的观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对大鼠牵张性脊髓损伤后神经细胞凋亡及Caspase 3 基因表达的影响.方法大鼠脊髓T13-L2经牵张损伤,CSEP监测P1-N1波幅下降至术前波幅70%后,于损伤平面以下经蛛网膜下腔置细导管,治疗组分别于术后即刻、1、2、3、4、8、12及 24 h经细导管注入bFGF溶液20 μl,对照组在相同时间注入等量生理盐水,然后于术后1、4、7、14及21 d处死取材.采用流式细胞仪、原位末端转移酶标记法(TUNEL)、Caspase 3 活性测定及免疫组织化学检测分方法别观察各组不同时相点神经细胞凋亡及Caspase 3 表达的变化.同时应用联合行为评分(CBS)及电生理检查观察大鼠功能恢复情况,采用计算机图像分析技术进行定量分析.结果脊髓损伤后对照组流式细胞仪检测的细胞凋亡率、TUNEL阳性细胞数、Caspase 3 阳性表达及活性测定在各时相点均明显高于正常组(9.4 %±1.7%比4.7%±0.9%、7.6 个/mm2±2.8个/mm2比4.0个/mm2±1.1个/mm2、894±74比501±31),bFGF治疗组与对照组相比则显著降低,二者比较差异有统计学意义(P＜0.05, 0.01).联合行为评分及皮层体感诱发电位也显示出大致相同的趋势. 结论 bFGF能抑制Caspase 3 蛋白的表达,降低Caspase 3 活性,减少继发性脊髓损伤细胞凋亡并促进脊髓神经功能的恢复.