过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂对大鼠肾成纤维细胞转化生长因子β1/Smad信号途径的作用研究

摘要

目的研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）激动剂阻断转化生长因子（TGF）β1致肾间质纤维化作用的机制,探讨其抗肾间质纤维化的潜在作用。方法体外培养大鼠肾成纤维细胞株（NRK/49F）,观察PPARγ配体15d-PGJ2及其激动剂曲格列酮和齐格列酮对TGFβ1诱导的纤维连接蛋白（FN）mRNA表达的影响。利用Western印迹技术观察PPARγ激动剂对TGFβ1诱导的FN和Smad蛋白表达的影响。结果（1）与1ng/ml TGFβ1组比较,5ng/ml TGFβ1组FN mRNA表达量增加了3·6倍（P＜0·01）,5ng/ml TGFβ1刺激24h时较刺激前增加了2·4倍（P＜0·01）,TGFβ1诱导FNmRNA表达呈一定范围内的剂量（0~5ng/ml）和时间（0~24h）依赖效应。（2）与5ng/mlTGFβ1组比较,10μmol15d-PGJ2、曲格列酮和齐格列酮预处理组FN mRNA表达量分别降低37·3%、41·5%和22·7%,FN蛋白表达量分别降低20·6%、38·1%和28·6%。（3）5ng/ml TGFβ1以时间（0~2h）依赖方式诱导p-Smad2/3蛋白表达量增加,作用1h时达到高峰;5ng/ml TGFβ1组p-Smad2/3蛋白表达量较对照组和2ng/ml TGFβ1组分别增加3·42倍和0·97倍。（4）15d-PGJ2、曲格列酮和齐格列酮预处理组p-Smad2/3蛋白表达量与5ng/ml TGFβ1组比较分别降低61·2%、53·0%和59·5%,3种药物干预组之间p-Smad2/3蛋白表达量比较差异无统计学意义,各组Smad2和Smad3蛋白表达量无显著变化。结论PPARγ激动剂可以抑制TGFβ1诱导的肾间质成纤维细胞细胞外基质合成,其机制可能与阻断TGF-β1/Smad信号途径有关,提示PPARγ激动剂具有抗肾间质纤维化的潜在作用,可能成为延缓终末期肾功能衰竭的治疗新手段之一。